糖尿病患者の歯周病悪化を誘発する新規因子の網羅的な解析および同定

糖尿病患者牙周病恶化新因素的综合分析与识别

• 批准号: 18791592
• 负责人: 成石 浩司
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791592/
• 关键词: 糖尿病; 歯周病悪化メカニズム; 歯肉線維芽細胞; 遺伝子マイクロアレイ解析; MMP-3

今年度は糖尿病患者における歯周病悪化の病態形成に関わる因子を網羅的に捉えるために,平成18年度に実施した遺伝子マイクロアレイの結果をもとに,動物モデルを用いて検証した。【材料および方法】1.実験動物:市販のKKayマウス(雄性,10週齢)およびC57BLマウス(雄性,10週齢)を用いた(日本クレア社)。2.免疫組織学的検討:KKayマウスおよびC57BLマウスの歯周組織および腎臓を回収し,4%パラホルムアルデヒド液に浸漬した後,MMP-3を標的として免疫組織染色を外注して行った(バイオ病理研究所,大分)。3.血清中MMP-3産生量の測定:マウス血清中のMMP-3濃度は,市販のELISAキット(R&D)を用いて定量した。MMP-3濃度の有意差は,Student's t-testを用いて検定した。4.細胞:ヒト歯肉由来線維芽細胞を用いDMEM中で培養した。5.カテプシン活性:dNCREBを細胞にトランスフェクションした後,通法に従いカテプシン活性を測定した。【結果】1.KKayマウスの歯肉組織におけるMMP-3発現は,対照マウスと比較して,とりわけマクロファージ系の細胞において増強されている傾向があった。腎臓組織では,逆にKkayマウスで抑制されている傾向があった。2.KKayマウスの血清中のMMP-3濃度は,対照マウスと比較して有意に抑制されていた(P<0.05)。3.CREB活性を抑制した細胞のカテプシン活性は有意に抑制された。【結論および考察】高血糖マウスの歯周組織におけるMMP-3の発現充進は,糖尿病患者にみられる歯周病悪化に関与する可能性を示唆する。しかしながら,血清あるいは腎臓におけるMMP-3発現抑制に起因する糖尿病病態の解明は将来の研究課題である。また,歯肉線維芽細胞のカテプシン活性の制御にCREB経路が関与することが明らかになった。これらが,歯周組織の破壊メカニズムの一翼を担う可能性が示唆された。

Our は diabetes に お け る 歯 weeks disease 悪 change の pathological form に masato わ る factor を snare に catch え る た め に, pp.47-53 18 year に be applied し た heritage 伝 son マ イ ク ロ ア レ イ の results を も と に, animal モ デ ル を with い て 検 card し た. 】 【 material お よ び method 1. Be 験 animals: city dealers の KKay マ ウ ス (male, 10 weeks 齢) お よ び C57BL マ ウ ス 齢 (male, 10 weeks) を い た (Japan ク レ ア club). Beg: 2. Immune histological 検 KKay マ ウ ス お よ び C57BL マ ウ ス の 歯 tissues お よ び renal viscera を back 収 し, 4% パ ラ ホ ル ム ア ル デ ヒ に ド liquid impregnation し た, MMP - 3 を mark と し て immunohistochemical staining を note し outside line て っ た (バ イ オ pathology institute, big points). 3. The determination of serum MMP - 3 quantity の : マ ウ ス は の MMPS - 3 concentration in serum, city dealers の ELISA キ ッ ト (R&D) を い て quantitative し た. The <s:1> intentional difference of MMP-3 concentration is を, and Student's t-testを determines the <s:1> た using を て検. 4. Cells :ヒト歯 meat-derived linear germ cells を were cultured in で DMEM for た た. 5. カ テ プ シ ン activity: dNCREB を cells に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た, hole に 従 い カ テ プ シ ン determination of active を し た. 【 results 】 1. KKay マ ウ ス の 歯 meat organization に お け る MMP - 3 発 は now, according to マ seaborne ウ ス と compare し て, と り わ け マ ク ロ フ ァ ー ジ cell の に お い て raised strong さ れ て い る tendency が あ っ た. Renal tissue で, reverse にKkay ウスで ウスで inhibits されて る る tendency があった. 2. KKay マ ウ ス の は の MMPS - 3 concentration in serum, as seaborne マ ウ ス と compare し て intentionally に inhibit さ れ て い た (P < 0.05). 3.CREB activity を inhibits the <s:1> カテプシ activity of the た cells intentionally に inhibits the された. 【 conclusion お よ び investigation 】 hyperglycemia マ ウ ス の 歯 tissues に お け る MMP - 3 の 発 now flooded with は, diabetes に み ら れ る 歯 weeks disease 悪 change に masato and す を る possibility in stopping す る. し か し な が ら, serum あ る い は renal viscera に お け る MMP - 3 発 inhibit に now cause す る diabetes morbidity の interpret は の research topic in the future で あ る. ま た, 歯 meat line d bud cells の カ テ プ シ ン の active suppression に after CREB 経 road が masato and す る こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder2 れらが,歯 Zhou organized a <s:1> to break 壊メカニズム a を to suggest う possibility が to suggest された.

项目成果

cAMP-response element binding protein (CREB) regulates cyclosporine-A-mediated down-regulation of cathepsin B and L synthesis

• DOI: 10.1007/s00441-007-0457-8
• 发表时间: 2007-10-01
• 期刊: CELL AND TISSUE RESEARCH
• 影响因子: 3.6
• 作者: Omori, Kazuhiro;Naruishi, Koji;Takashiba, Shogo
• 通讯作者: Takashiba, Shogo

高血糖状態で培養したヒト歯肉線維芽細胞の網羅的な遺伝子解析

高血糖条件下培养的人牙龈成纤维细胞的综合遗传分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: 第20回日本顎頭蓋機能学会記念学術大会抄録集 20巻・1号
• 作者: Omori;K;et. al.;成石浩司ら
• 通讯作者: 成石浩司ら