DNAチップを用いた歯周組織における内因性アデノシンの抗炎症作用の網羅的解析

利用DNA芯片综合分析牙周组织内源性腺苷的抗炎作用

• 批准号: 18791591
• 负责人: 寺倉 まみ
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791591/
• 关键词: アデノシン; DNA microarray; 網羅的解析; Thioredoxih binding protein-2; thioredoxin binding protein-2

ヒト歯肉線維芽細胞(HGF)のin vitro培養系にてアデノシン(100μM)存在あるいは非存在下で3時間培養後、全RNAを抽出し、AffymetrixHumanGenomeU133Plus2.0Array(47,000Genes,54,000-geneprobe)を用いて分析し、GeneSpringを用いて解析した。その結果、47遺伝子の発現の増強(Ratio>2)を認め、無刺激の場合と比較してTBP-2mRNAの発現の著しい増加(Ratio=14.4)が認められた。そこで、HGFにアデノシン(100pM)存在下で1.5、3、6、12、24時間培養後、それぞれ全RNAを抽出し、RT-PCR法を用いて、GeneChipで高い発現が認められたTBP-2遺伝子について発現の確認を行った。その結果、HGF中のTBP-2mRNAの発現は、刺激後3時間をピークとして増加することが明らかとなった。さらに、HGFをアデノシン存在下で、アデノシンレセプターA1特異的アンタゴニスト(CPX)、アデノシンレセプターA2a特異的アンタゴニスト(CSC)を添加することにより、HGF中のTBP-2mRNA発現の増加は、CSC添加では著明な変化は見られなかったが、CPXの添加により抑制されることが確認できた。TBP-2は、ラジカル消去作用や抗酸化作用など細胞内外のレドックス環境を調節すると考えられおり、炎症歯周組織における酸化ストレスの制御への関与が強く示唆される。本研究の成果は、アデノシンレセプターを介した炎症反応制御を受けていると考えられている歯周病の疾患を理解する上で有益な情報を提供してくれるものと考えられる。

After cultured in vitro for 3 hours in the presence or absence of HGF (100μM), total RNA was extracted, AffymetricHumanGenomeU133Plus2.0 Array (47,000 Genes, 54,000-geneprobe) was analyzed and GeneSpring was analyzed. The results showed that the expression of TBP-2mRNA increased (Ratio = 14.4) in the absence of stimulation, and the expression of TBP-2mRNA increased (Ratio=14.4) in the absence of stimulation. After incubation for 1.5, 3, 6, 12, and 24 hours in the presence of HGF, complete RNA was extracted, RT-PCR was used, and GeneChip was highly detected. The results showed that TBP-2mRNA expression in HGF increased 3 times after stimulation. In addition, in the presence of HGF, the addition of CPX and CSC, TBP-2mRNA expression in HGF was increased and CSC addition was inhibited. TBP-2 has anti-acidification and anti-acidification effects. It regulates the intracellular and extracellular environment. It is related to the regulation of acidification in inflammatory tissues. The results of this study provide useful information on the prevention and treatment of inflammatory diseases.

项目成果

Activation of adenosine receptor on gingival fibroblasts.

牙龈成纤维细胞上腺苷受体的激活。

• DOI: 10.1177/154405910608500810
• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of dental research
• 影响因子: 7.6
• 作者: Hashikawa,T;Takedachi,M;Terakura,M;Yamada,S;Thompson,LF;Shimabukuro,Y;Murakami,S
• 通讯作者: Murakami,S