植物のゲノムメンテナンスとエピジェネティック制御機構の解析

植物基因组维护和表观遗传控制机制分析

• 批准号: 18870012
• 负责人: 武田 真
• 金额: $ 1.74万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18870012/
• 关键词: エピジェネティクス; ゲノムメンテナンス; シロイヌナズナ

本研究では、ゲノムメンテナンスとエピジェネティック制御の双方に関わるシロイヌナズナの核内因子BRU1を中心に解析を行った。BRU1は複製時のクロマチンの再構築に関わると推定されているが、bru1変異体では、クロマチンを介した制御を受ける広範な遺伝子発現制御に乱れを生じ、そのために種々の形態異常が誘発されると考えられている。前年度の研究では、2つのbru1変異体アリルにおいて、polycomb group因子群によってエピジェネティックな発現抑制維持を受ける遺伝子の制御にも乱れが生じることを報告した。今年度は、このような遺伝子の乱れがどの細胞で起きているかを細胞組織化学的に調べた。その結果、本来種子の形成過程で起きる遺伝子の発現が、葉の組織でstochasticに発現することが判明した。これらの結果は、上述の仮説を支持するとともに、BRU1が重要な因子であることをさらに裏付けた。BRU1は、2つのタンパク質相互作用ドメインをもつ新規の核タンパク質をコードするが、その分子機能が不明なままである。そこで、BRU1結合因子を明らかにすべく、TAPシステムを利用したBRU1複合体の精製を試みた。BRU1-TAP融合たんぱく質をBRU1プロモーターの制御下で発現させたシロイヌナズナ細胞の粗抽出液より、2段階のアフィニティー精製を行ったところ、BRU1を含むタンパク質画分を得ることができた。これらの結果をもとに、BRU1複合体を形成する因子の同定を行うことで、DNA複製時のクロマチン再構築に関与するBRU1やその結合因子の機能解明が進むものと期待している。

This study で は, ゲ ノ ム メ ン テ ナ ン ス と エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク suppression の both に masato わ る シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ の nuclear factor within BRU1 を center line analytical を に っ た. BRU1 は replication is の ク ロ マ チ ン の to construct に masato わ る と presumption さ れ て い る が, BRU1 - variant で は, ク ロ マ チ ン を interface し た suppression を by け る hiroo van な heritage 伝 son 発 now suppression に disorderly れ を じ, そ の た め に kind 々 の abnormal-looking が 発 lure さ れ る と exam え ら れ て い る. Before the annual の research で は, 2 つ の bru1 - variant ア リ ル に お い て, polycomb group factor group に よ っ て エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク な 発 inhibit now maintain を by け る heritage 伝 son の suppression に も disorderly れ が raw じ る こ と を report し た. Our は, こ の よ う な heritage 伝 son の disorderly れ が ど の cell で き て い る か を cell histochemical に adjustable べ た. そ の results, the formation process of original seed の で き る posthumous son 伝 の 発 が, leaf の で stochastic に 発 now す る こ と が.at し た. は こ れ ら の results, the above の 仮 says を support す る と と も に, BRU1 が important factor な で あ る こ と を さ ら に in pay け た. BRU1 は, 2 つ の タ ン パ ク qualitative interaction ド メ イ ン を も つ new rules の nuclear タ ン パ ク qualitative を コ ー ド す る が, そ の が molecular function is unknown な ま ま で あ る. そ こ で, BRU1 combination factor を Ming ら か に す べ く, TAP シ ス テ ム を using し た BRU1 complex の refined を try み た. BRU1 - TAP fusion た ん ぱ く qualitative を BRU1 プ ロ モ ー タ ー の under the system of imperial で 発 now さ せ た シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ cells の crude extract よ り, 2-stage の ア フ ィ ニ テ ィ ー refined を line っ た と こ ろ, BRU1 を containing む タ ン パ ク qualitative draw points を る こ と が で き た. こ れ ら の results を も と に, BRU1 complex を formation す る factor の with fixed line を う こ と で, DNA replication の ク ロ マ チ ン to construct に masato and す る BRU1 や そ の combined function of factor の interpret が into む も の と expect し て い る.

项目成果

Biochemical analysis of BRU1 involved in genome maintenance and epigenetic gene regulation in Arabidopsis.

BRU1 参与拟南芥基因组维护和表观遗传基因调控的生化分析。

• 发表时间: 2007
• 作者: 大野裕介;他3名
• 通讯作者: 他3名