神経型電位依存性カルシウムチャネルの新たな制御機構の解析と病態生理学的意義

神经元电压门控钙通道新调控机制及其病理生理意义分析

• 批准号: 18890087
• 负责人: 白川 久志
• 金额: $ 1.61万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890087/
• 关键词: 神経科学; 薬理学; 脳神経疾患; てんかん

平成19年度は研究対象としている神経型電位依存性Ca^<2+>チャネルの中枢神経変性疾患モデル(in vitroおよびin vivo)における解析に重点を置き、その病態形成における役割について検討した結果、以下の新結果を得た。1.昨年度の研究において、ヒスタミンやブラジキニンといったGPCRアゴニストが低pH条件下において神経細胞死を誘発すること、またその過程でTRPV1およびL型電位依存性Ca^<2+>チャネルの活性化が重要な役割を果たすことを新規に見出したことから、in vivo一過性脳虚血モデルを構築し、実験を行った。その結果、TRPV1阻害薬であるcapsazepineの適用により、神経学的症状および虚血負荷により惹起される梗塞巣が顕著に抑制された。さらにTRPV1+/-マウスおよびTRPV1-/-マウスにおいても梗塞巣の形成が有意に抑制された。以上の結果より、TRPV1およびその下流に派生するCa^<2+>シグナリングは脳虚血傷害の発生において重要な役割を果たしていることが示された。2.細胞内Ca^<2+>の恒常性の破綻に起因する中枢神経変性疾患として、てんかん症候群およびそれに付随する運動失調症が挙げられることから、本年はP/Q型電位依存性Ca^<2+>チャネルをコードする遺伝子であるcacnalaにm251Kミスセンス変異を有し、てんかんおよび運動失調を示す初の変異ラットであるgroggyラットから調製した小脳プルキンエ細胞を用いて、P/Q型電位依存性Ca^<2+>チャネル電流を測定した。最大応答を示した膜電位における電流密度を比較したところ、groggyラットにおいて電流密度の有意な増加が認められた。また、groggyラットの活性化曲線は正常ラットのそれと比較して、脱分極方向ヘシフトしており、groggyラットの不活性化曲線は脱分極方向ヘシフトしていた。低閾値活性化型電位依存性Ca^<2+>チャネル電流の各種パラメータにおいては有意な変化は観察されなかった。本研究で得られた知見は、これら小脳プルキンエ細胞の機能変化に起因する難治性神経疾患に対する新たな洞察を提供するものであると考えられる。

Pp.47-53 19th annual は research like と seaborne し て い る god 経 type potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル の central 経 god - disorder モ デ ル (in vitro お よ び in vivo) に お け る parsing に key を buy き, そ の pathological form に お け る service cut に つ い て beg し 検 た results, the following new results た を の. 1. Research on yesterday's annual の に お い て, ヒ ス タ ミ ン や ブ ラ ジ キ ニ ン と い っ た GPCR ア ゴ ニ ス ト が under the condition of low pH に お い て god 経 を induced cell death 発 す る こ と, ま た そ の process で TRPV1 お よ び L potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル の activeness が important な "を cut fruit た す こ と を new rules に shows し た こ Youdaoplaceholder0 ら, in vivo transient 脳 hypoxic blood モデ モデ を を construction <s:1>, practical を work った. そ の results, TRPV1 resistance against 薬 で あ る capsazepine の applicable に よ り, god 経 symptoms お よ び virtual blood load に よ り provoked さ れ る infarction 巣 が 顕 the に inhibit さ れ た. Youdaoplaceholder0 TRPV1+/- ウスおよびTRPV1-/- ウスにお ウスにお て て the formation of infarcted vesicles が intentionally に inhibits された. の above results よ り, TRPV1 お よ び そ の obscene に derived す る Ca ^ 2 + > < シ グ ナ リ ン グ は 脳 virtual blood damage の 発 raw に お い て important な "を cut fruit た し て い る こ と が shown さ れ た. 2. The intracellular Ca ^ 2 + > < の constancy の flaw cause に す る central 経 god - disorder と し て, て ん か ん syndrome お よ び そ れ に pay with す る movement disorder が 挙 げ ら れ る こ と か ら, this year P/Q type は potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル を コ ー ド す る heritage 伝 son で あ る cacnala に m251K ミ ス セ ン ス - different を し, て ん か ん お よ び ataxia を shown early す の - different ラ ッ ト で あ る groggy ラ ッ ト か ら modulation し た small 脳 プ ル キ ン エ cells を using い て, P/Q type potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル current を determination し た. Biggest 応 answer を shown し た membrane potential に お け る current density を compare し た と こ ろ, groggy ラ ッ ト に お い て current density の intentionally な raised plus が recognize め ら れ た. ま た, groggy ラ ッ ト の activeness curve は normal ラ ッ ト の そ れ と compare し て, polarization direction ヘ シ フ ト し て お り, groggy ラ ッ ト の activity does not melt off curve は polarization direction ヘ シ フ ト し て い た. Low threshold numerical activation potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル current の various パ ラ メ ー タ に お い て は intentionally な variations change は 観 examine さ れ な か っ た. This study で have ら れ た knowledge は, こ れ ら small 脳 プ ル キ ン の エ cells function - the に cause す る refractory god 経 disorders に す seaborne る new た な insight を provide す る も の で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

TRPV1 mediates vanilloids and low pH-induced neurotoxicity in rat cortical cultures

TRPV1 在大鼠皮质培养物中介导香草酸和低 pH 诱导的神经毒性

• 发表时间: 2007
• 作者: Shirakawa;H.;Yamaoka;T.;Sanpei;K.;Nakagawa;T.;Kaneko;S.
• 通讯作者: S.

Increased Ca^<2+> channel currents in cerebellar Purkinje cells of the ataxic groggy rat

共济失调昏昏沉沉的大鼠小脑浦肯野细胞中 Ca^<2> 通道电流增加

• 发表时间: 2008
• 期刊: Neurosci Lett 426
• 作者: Tanaka K;Shirakawa H;Okada K;Konno M;Nakagawa T;Serikawa T;Kaneko S
• 通讯作者: Kaneko S

TRPV1 mediates neurotoxicity induced by Gq-coupled receptor agonists at slightly low pH

TRPV1 在稍低 pH 条件下介导 Gq 偶联受体激动剂诱导的神经毒性

• 发表时间: 2007
• 作者: Shirakawa;H.;Yamaoka;T.;Sanpei;K.;Nakagawa;T.;Kaneko;S.
• 通讯作者: S.

Ca2+ mobilization mediated by transient receptor potential canonical 3 is associated with thrombin-induced morphological changes in 1321N1 human astrocytoma cells

• DOI: 10.1002/jnr.21711
• 发表时间: 2008-09-01
• 期刊: JOURNAL OF NEUROSCIENCE RESEARCH
• 影响因子: 4.2
• 作者: Nakao, Kenji;Shirakawa, Hisashi;Kaneko, Shuji
• 通讯作者: Kaneko, Shuji