消化器がんにおけるREG蛋白質の発現と患者予後判定

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膵β細胞の増殖因子として発見されたREG (Regenerating gene)は、REG Iα、 REG Iβ、 REG III、 HIP/PAP、 REG IVの5つの遺伝子ファミリーから構成されている。近年、種々の消化器がんにおいてREG Iα遺伝子が発現していること、さらにはREG Iα遺伝子の発現が患者の予後と負の相関関係を示すことが明らかとされつつある。本研究の目的は、各REGタンパク質に対するモノクローナル抗体を作成し、それらを用いて種々の消化器がんにおける各REGの発現を検討することにより、それらの発現とがん患者の生命予後との関係を明らかにすることである。本年度は、以下の成果が得られた。1)昨年度に精製まで完了したREG Iα、 REG IβおよびREG IVに対するモノクローナル抗体に加え、本年度ではREG IIIおよびHIP/PAPに対するモノクローナル抗体の精製が終了した。2)各REG遺伝子を過剰発現させた培養細胞系の上清を精製することにより、非常に純度の高い(〜100%)各REGタンパク質が得られた。3)2)で得られた各REGタンパク質を抗原に用いて、ウエスタンブロット法を施行した。その結果、1)で得られた各モノクローナル抗体の特異性が確認された。以上の結果により、各REGタンパク質の発現を特異的に認識することが可能となった。現在、各モノクローナル抗体を用いた免疫組織染色の条件設定を行っている。