マダニの中腸・唾液腺由来の抗原虫物質に関する分子生物学的研究

蜱中肠和唾液腺抗原虫物质的分子生物学研究

• 批准号: 06J01138
• 负责人: 白藤 梨可 (梅宮 梨可)
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kagoshima University (2008)Gifu University (2006-2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J01138/
• 关键词: マダニ; フタトゲチマダニ; 中腸; 分子生物学; オートファジー; オートファジー関連遺伝子; オートファゴソーム; 抗原虫物質; 唾液腺; マクロファージ遊走阻止因子; 血管新生

今年度は、昨年度に引き続き、フタトゲチマダニHaemaphysalis longicornisのcDNAライブラリーからオートファジー関連(ATG)遺伝子に相同な新規3遺伝子を単離することに成功した(HlATG3、HlATG4、HlATG8)。これらはいずれも、栄養飢餓誘導性の細胞質内タンパク質分解機構「オートファジー」の最も重要な過程であるオートファゴソーム形成に必須なATG遺伝子と非常に高い相同性を示した。これらの遺伝子発現をリアルタイムPCRにより解析したところ、HlATG3の発現は若ダニ期でのみ吸血時(富栄養条件下)において減少し、HlATG4は幼・若ダニ期の吸血時に発現が減少した。一方、HlATG8の発現はすべての活動性発育期(幼・若・成ダニ期)において吸血時に減少した。また、未吸血時の中腸細胞内におけるHlAtgタンパク質の局在をウエスタンブロット法で調べたところ、HlAtg3は細胞質、HlAtg8は細胞骨格画分に検出された。さらに、未吸血期の中腸細胞質内には、吸血時に比べて糖質と脂質が多く、それらが栄養分として貯蔵されているものと考えられ、未吸血マダニの中腸は栄養貯蔵器官であることが確認された。電子顕微鏡により、未吸血マダニの中腸細胞質内には隔離膜、オートファゴソーム、オートリソソーム様の膜構造体が存在することも明らかになった。これらのことから、未吸血・飢餓条件下にある中腸細胞質内においてオートファジーによるタンパク質分解機構が機能していることが示された。また、これまでに単離したHlATG遺伝子群のmRNA発現量は、非感染マダニに比してバベシア原虫感染マダニにおいて増大するというデータも得られており、病原体感染時におけるオートファジーとマダニHlATG遺伝子・HlAtgタンパク質との関わりが強く示唆された。

This year, the cDNA sequence of Haemaphysalis longicornis was successfully identified (HlATG3, HlATG4, HlATG8). The most important process in the formation of starvation-induced cytoplasmatic breakdown mechanism is the ATG gene, which is very similar to that of starvation-induced cytoplasmon. The expression of HlATG3 and HlATG4 in the early stage of blood feeding (under rich culture conditions) decreased significantly. On the one hand, HlATG8 appears during the active development period (juvenile period) and during the blood feeding period. HlAtg 3, HlAtg8, HlAtg 3, HlAtg 8, HlAtg 9, HlAtg 9, HlAtl In addition, in the non-blood-sucking period, the cytoplasm of the midgut is more abundant than that of the blood-sucking period. In the non-blood-sucking period, the midgut is more abundant than that of the blood-sucking period. The membrane structure in the cytoplasm of the intestine is isolated by electron microscopy. In the absence of blood and starvation conditions, the cytoplasm of the midgut is disrupted. The mRNA expression of HlATG gene subgroup was higher in non-infected than in protozoan infection. The mRNA expression of HlATG gene was higher in pathogen infection than in protozoan infection.

项目成果

Cloning and characterization of an autophagy-related gene, ATG12, from the three-host tick Haemaphysalis longicornis

• DOI: 10.1016/j.ibmb.2007.05.006
• 发表时间: 2007-09-01
• 期刊: INSECT BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
• 影响因子: 3.8
• 作者: Umemiya, Rika;Matsuo, Tomohide;Fujisaki, Kozo
• 通讯作者: Fujisaki, Kozo

Strategy of a three host tick Haemaphysalis longicornis against starvation during the nonfeeding period

三宿主蜱长角血蜱在非取食期抵抗饥饿的策略

• 发表时间: 2008
• 作者: Umemiya-Shirafuji R;Matsuo T;Boldbaatar D;Liao M;Tanaka T;Fujisaki K
• 通讯作者: Fujisaki K

Haemaphysalis longicornis:: Molecular characterization of a homologue of the macrophage migration inhibitory factor from the partially fed ticks

• DOI: 10.1016/j.exppara.2006.07.006
• 发表时间: 2007-02-01
• 期刊: EXPERIMENTAL PARASITOLOGY
• 影响因子: 2.1
• 作者: Umemiya, Rika;Hatta, Takeshi;Fujisaki, Kozo
• 通讯作者: Fujisaki, Kozo

Characterization of autophagy-related gene homologues from a three host tick, Haemaphysalis longicornis.

来自三宿主蜱（长角血蜱）的自噬相关基因同源物的表征。

• 发表时间: 2008
• 作者: 白藤(梅宮)梨可;他
• 通讯作者: 他

フタトゲチマダニHaemaaphysalis longicornisにおける新規オートファジー関連遺伝子の単離およびそれらの発現動態

长角血蜱中新型自噬相关基因的分离及其表达动态

• 发表时间: 2007
• 作者: 吉江直樹;鈴木光次;桑田晃;齊藤宏明;吉江直樹;Umemiya-Shirafuji R;Rika Umemiya;Rika Umemiya;Rika Umemiya;白藤(梅宮)梨可;Rika Umemiya-Shirafuji;Rika Umemiya-Shirafuji;白藤(梅宮)梨可;梅宮 梨可
• 通讯作者: 梅宮 梨可