Developing the screening strategy for the drug resistance in tick based on the acaricide resistant mechanism

基于杀螨剂耐药机制制定蜱耐药性筛选策略

• 批准号: 20F20093
• 负责人: 辻 尚利
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-07-29 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20F20093/
• 关键词: フタトゲチマダニ; 殺ダニ剤; SNP; 遺伝子ドライブ; CRISPR-Cas9; 次世代マダニ制御技術

マダニは吸血性の節足動物である。したがって、宿主動物の血液は、マダニ種の存続と繁栄を司る唯一無二の栄養源といえる。マダニの吸血は、ヒトや動物などの宿主の貧血、皮膚の損傷、および畜産物の生産効率に甚大な直接的被害を及ぼしており、さらにはウイルス・細菌・リケッチア・寄生虫など、多種多様な病原体を媒介することによる間接的被害をももたらす。このようなマダニとマダニ媒介感染症を未然に抑制する科学的に裏付けられた手段が、有機リンや合成ピレスロイド等の殺ダニ剤の使用であるが、殺ダニ剤の頻回投与や不適切な散布等により、現在多くの国でこれらの殺ダニ剤に対する抵抗性を獲得したマダニの出現と生息域の拡大が問題となっていることから、本研究では抵抗性形質の迅速な検出法の開発を企図する。初年度は、アミノ酸置換を伴うSNPの特定に成功したことから、本SNPを標的としたCRISPR-Cas9診断またはノックアウト技術の開発による次世代型マダニ制御技術の開発に資する知見を得ることができた。そこで、本年度はCRISPR-Cas9のフタトゲチマダニへの導入を目指し、蛍光タンパク質に卵細胞膜受容体に結合する卵黄タンパク質ペプチド断片を組込み飽血マダニの血体腔へ導入した。これにより、卵巣のみならず卵そのものへのタンパク質移行を確認することができた。今後は蛍光タンパク質をCas9タンパク質へと置き換え、殺ダニ剤標的オクトパミン遺伝子のSNP診断またはノックアウト技術の構築に結び付ける予定である。

Youdaoplaceholder0 ダニ a blood-sucking arthropod である. Youdaoplaceholder0 たがって, blood of host animal <s:1>, ダニ ダニ, ダニ species of 続と breeding 栄を, る unique 栄 source of breeding と える える える. マ ダ ニ の vampire は, ヒ ト や animal な ど の の の anemia, skin injury, host お よ の び livestock products in the production of great working rate に な directly murdered を and ぼ し て お り, さ ら に は ウ イ ル ス, bacteria, リ ケ ッ チ ア, parasites な ど, many many others な pathogens を medium す る こ と に よ る indirect murder を も も た ら す. こ の よ う な マ ダ ニ と マ ダ ニ media adapting just-in-time inventory に を what shall restrain す る pay in scientific に け ら れ た means が, organic リ ン や synthetic ピ レ ス ロ イ ド etc. の kill ダ ニ tonic の use で あ る が, kill ダ ニ の frequency back to vote with や does not appropriate な spread such as に よ り, now many く の countries で こ れ ら の kill ダ ニ tonic に す seaborne る resistance を get し た マ ダ ニ の と interest-bearing domain の company, big が problem と な っ て い る こ と か ら, this study で は resistance character の quickly な 検 out method の open 発 を companies 図 す る. Early annual は, ア ミ ノ acid replacement を with う SNP の specific に successful し た こ と か ら, the SNP を mark と し た CRISPR - Cas9 diagnosis ま た は ノ ッ ク ア ウ ト technology の open 発 に よ る nextgen type マ ダ ニ suppression technology の open 発 に endowment す る knowledge を must る こ と が で き た. そ こ で, this year's は CRISPR - Cas9 の フ タ ト ゲ チ マ ダ ニ へ の import を refers し 蛍 light タ ン パ ク qualitative に egg membrane by let body に combining す る yolk タ ン パ ク qualitative ペ プ チ ド fragment を group 込 み full blood マ ダ ニ の blood coelom へ import し た. こ れ に よ り, egg 巣 の み な ら ず eggs そ の も の へ の タ ン パ ク mass migration を confirm す る こ と が で き た. Future は 蛍 light タ ン パ ク qualitative を Cas9 タ ン パ ク qualitative へ と buy き change え, kill ダ ニ tonic mark オ ク ト パ ミ ン posthumous son 伝 の SNP diagnosis ま た は ノ ッ ク ア ウ の ト technology to construct に knot び pay け る designated で あ る.

项目成果

Insight into the embryogenesis of the parthenogenetic ixodid tick, Haemaphysalis longicornis based on a classic transcriptomic study.

基于经典的转录组学研究，深入了解单性生殖蜱蜱（Haemaphysalis longicornis）的胚胎发生。

• 发表时间: 2021
• 作者: Kofi Dadzie Kwofie;Emmanuel Pacia Hernandez;Hayato Kawada;Samuel Dadzie;Danielle Ladzekpo;Makoto Matsubayashi;Daisuke S. Yamamoto;Hirotomo Kato;Shiroh Iwanaga;Naotoshi Tsuji;Takeshi HATTA.
• 通讯作者: Takeshi HATTA.

フタトゲチマダニの胚発生における古典的トランスクリプトーム解析．

硬蜱胚胎发育的经典转录组分析。

• 发表时间: 2020
• 作者: Emmanuel Pacia HERNANDEZ;Hayato KAWADA;Daisuke S. YAMAMOTO;Hirotomo Kato;Makoto MATSUBAYASHI;Tetsuya TANAKA;Naotoshi TSUJI;Takeshi HATTA;コフィ コフィ，エマニュエル ヘルナンデス，サミュエル ダジ，ダニエル ラゼクポ，坪川大悟，三上房子，松林 誠，岩永史朗，辻 尚利，八田岳士．
• 通讯作者: コフィ コフィ，エマニュエル ヘルナンデス，サミュエル ダジ，ダニエル ラゼクポ，坪川大悟，三上房子，松林 誠，岩永史朗，辻 尚利，八田岳士．

フタトゲチマダニ伸長因子1α(EF1α)遺伝子の上流領域解析．

硬蜱延伸因子 1α (EF1α) 基因上游区域的分析。

• 发表时间: 2020
• 作者: Emmanuel Pacia HERNANDEZ;Hayato KAWADA;Daisuke S. YAMAMOTO;Hirotomo Kato;Makoto MATSUBAYASHI;Tetsuya TANAKA;Naotoshi TSUJI;Takeshi HATTA;コフィ コフィ，エマニュエル ヘルナンデス，サミュエル ダジ，ダニエル ラゼクポ，坪川大悟，三上房子，松林 誠，岩永史朗，辻 尚利，八田岳士．;エマニュエル ヘルナンデス，コフィ コフィ，坪川大悟，三上房子，松林 誠，辻 尚利，田仲哲也，八田岳士．
• 通讯作者: エマニュエル ヘルナンデス，コフィ コフィ，坪川大悟，三上房子，松林 誠，辻 尚利，田仲哲也，八田岳士．

Promoter analysis of elongation factor 1-alpha (EF1α) derived from Haemaphysalis longicornis.

来自长角血蜱的伸长因子 1-α (EF1α) 的启动子分析。

• 发表时间: 2021
• 作者: Emmanuel Pacia HERNANDEZ;Hayato KAWADA;Daisuke S. YAMAMOTO;Hirotomo Kato;Makoto MATSUBAYASHI;Tetsuya TANAKA;Naotoshi TSUJI;Takeshi HATTA
• 通讯作者: Takeshi HATTA