Cdt1結合蛋白質の網羅的同定によるDNA複製の細胞周期制御機構の解明

通过全面鉴定Cdt1结合蛋白阐明DNA复制的细胞周期控制机制

• 批准号: 06J01925
• 负责人: 杉本 のぞみ
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Japan Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J01925/
• 关键词: DNA複製; Cdt1; MCM; ORC1; CDC6; 再複製; APC; C; Cdh1; SNF2H; topoisomerase I; topoisomerase IIα; PCNA; Cullin4; チェックポイント

M期後期〜G1期にかけてORC/CDC6/Cdt1がMCM複合体をクロマチンに呼び込む。細胞周期につき一回の複製を保証するため、それらの因子の機能はS期以降制御されている。しかし、各因子の制御の厳密性には違いがある。例えば、Cdt1抑制には分解およびgeminin結合という複数の機構が存在する一方で、CDC6はCdkリン酸化によって一部が核外排出されるのみである。癌細胞において、Cdt1あるいはCdt1+CDC6の過剰発現により再複製が誘導されるという報告があるが、癌細胞ではライセンス化因子は過剰発現しているため、正常細胞を用いた解析が重要である。また、ヒトORC1はS期に分解されるが、その脱制御による影響は不明である。そこで、これらの因子の同時脱制御によって正常細胞においても再複製が誘導されるのかを調べた。まず、ヒト繊維芽細胞をTERTで不死化したHFF2/T細胞、および腎臓細胞をアデノウイルスのE1A/E1Bで不死化した293T細胞に、Cdt1、ORC1、CDC6それぞれを単独に過剰発現させたが、有意な再複製は起きなかった。次にCdt1+ORC1あるいはCdt1+CDC6を過剰発現させたところ、有意な再複製が惹起された。一方、ORC1+CDC6の過剰発現では再複製は起きなかった。さらにCdt1+ORC1+CDC6を同時に過剰発現させると、より強い再複製が引き起こされ、MCMのクロマチン結合量も増加した。以上の結果から、再複製抑制のため、MCMローディング因子の機能は厳密かつredundantに抑制されており、一つの脱制御では破綻は生じないが、Cdt1に加えORC1及び/あるいはCDC6の脱制御により、正常細胞においても再複製が誘導されることが示された。またこれらの結果は、再複製抑制におけるORC1制御の重要性を示した最初の報告ともなる。

ORC/CDC6/Cdt1 MCM complex from late M to G1 The cell cycle cycle is a cycle of replication, and the function of these factors is controlled by the S phase. Each factor controls the confidentiality of the system. For example, Cdt1 inhibition is divided into two parts: geminin binding, CDC6 acidification and exonucleation. Cancer cells, Cdt1, Cdt1 + CDC6, Cdt1 + CDCdt The first phase of ORC decomposition, the second phase of ORC degradation, the third phase of ORC degradation, the fourth phase of ORC degradation. In addition, the gene expression of these genes is also regulated by the gene expression in normal cells. In addition, the cell cycle of HFF2/T cells, CD3/CD4/CD4 Cdt1 + ORC1 + CDC6 + CDC1 + CDC1 + CDC2 + CDC3 + CDC3 + CDC4 + CDC4 + CDC One side, ORC1+CDC6, and then appear again. Cdt1 + ORC1 + CDC6 + CDC1 + CDC2 + CDC2 + CDC3 + CDC4 + CDC4 + CDC The above results show that the function of MCM gene is to inhibit replication, to inhibit replication. The importance of ORC1 control is shown in the initial report.

项目成果

新規Cdt1結合蛋白質GRWD1は細胞周期制御に関与しがん細胞で過剰発現している

新型 Cdt1 结合蛋白 GRWD1 参与细胞周期控制，并在癌细胞中过度表达。

• 发表时间: 2008
• 作者: Y. Anan;L. Somekawa and K. T. Suzuki;Nozomi Sugimoto;Nozomi Sugimoto;Yasutoshi Tatsumi;Hideo Nishitani;杉本のぞみ;Nozomi Sugimoto;小佐野怜子
• 通讯作者: 小佐野怜子

Chromatin-modifying proteins that bind to Cdt1 and promote pre-RC formation

与 Cdt1 结合并促进前 RC 形成的染色质修饰蛋白

• 发表时间: 2008
• 作者: Sugimoto N;Waga S;Kiyono T;Fujita;M.;藤田雅俊;Nozomi Sugimoto
• 通讯作者: Nozomi Sugimoto

Deregulation of Cdt1 induces chromosomal damage without rereplication and leads to chromosomal instability

• DOI: 10.1242/jcs.03031
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Tatsumi, Yasutoshi;Sugimoto, Nozomi;Fujita, Masatoshi
• 通讯作者: Fujita, Masatoshi

複数のライセンシング因子に対する冗長かつ特異的な制御がヒト正常細胞における再複製抑制を保証している

多个许可因子的冗余和特定调节确保抑制正常人体细胞的复制

• 发表时间: 2008
• 作者: Y. Anan;L. Somekawa and K. T. Suzuki;Nozomi Sugimoto;Nozomi Sugimoto;Yasutoshi Tatsumi;Hideo Nishitani;杉本のぞみ
• 通讯作者: 杉本のぞみ

新規結合蛋白質の同定によるヒトCdt1制御機構・機能の解明.

通过鉴定新型结合蛋白阐明人类 Cdt1 调节机制和功能。

• 发表时间: 2007
• 作者: Y. Anan;L. Somekawa and K. T. Suzuki;Nozomi Sugimoto;Nozomi Sugimoto;Yasutoshi Tatsumi;Hideo Nishitani;杉本のぞみ;Nozomi Sugimoto;小佐野怜子;杉本のぞみ;小佐野怜子;杉本のぞみ
• 通讯作者: 杉本のぞみ