魚類のエラにおけるアンモニア排泄機構の解明

阐明鱼鳃的氨排泄机制

• 批准号: 06J05667
• 负责人: 中田 勉
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J05667/
• 关键词: エラ; アンモニア; 窒素代謝; Rh

窒素代謝の最終段階として,硬骨魚類はエラから直接アンモニアを排泄することが知られているが,その分子メカニズムは明らかにされていない。一方,脊椎動物に広く保存されているRhファミリー分子が,アンモニア輸送活性を持つことが近年明らかになった。このファミリーが硬骨魚類のアンモニア排泄を担うという仮説を立て,これを検証するために,全ゲノムが解読されているトラフグを用いて研究を行った。データベース検索により,フグゲノム上にはRhAGのオーソログが1つ(fRhag),RhBGが1つ(fRhbg),RhCGが2つ(fRhcgl,2),それぞれ存在することが明らかになった。これら全分子についてノーザン解析を行った結果,全ての遺伝子がエラに強く発現していた。次にこれらの遺伝子の組織内での発現部位を明らかにするために,in situ hybridizationを行った。その結果,Rhagはpillar cellに,Rhbg及びRhcg2はpavement cellに,Rhcg1はmitochondrion-rich cell(MRC)にそれぞれ発現が見られた。更に免疫染色を行った結果,Rhagはpillar cellのアピカル膜とバソラテラル膜の両方に局在することが明らかになった。Rhbg及びRhcg2はpavement cellのバソラテラル膜,アピカル膜にそれぞれ局在していた。またRhcg1はMRCのアピカル膜に局在していた。また,これらの分子が実際にアンモニア輸送活性を持つかどうかを確認するため,アフリカツメガエル卵母細胞を用いた発現実験を行った。その結果,全ての分子にメチルアンモニア輸送活性が確認された。以上の結果から,Rhファミリーが硬骨魚類のエラからのアンモニア排泄に重要な役割を果たしていることが示唆された。

Smothering element metabolism の eventually Duan Jie と し て, bony fishes は エ ラ か ら directly ア ン モ ニ ア を discharge す る こ と が know ら れ て い る が, そ の molecular メ カ ニ ズ ム は Ming ら か に さ れ て い な い. Side, vertebrate に hiroo く save さ れ て い る Rh フ ァ ミ リ ー が, ア ン モ ニ ア conveying active を hold つ こ と が in recent years, Ming ら か に な っ た. こ の フ ァ ミ リ ー が bony fishes の ア ン モ ニ ア discharge を bear う と い う 仮 said を て, こ れ を 検 card す る た め に, full ゲ ノ ム が solution 読 さ れ て い る ト ラ フ グ を with い を line っ て research た. デ ー タ ベ ー ス 検 cable に よ り, フ グ ゲ ノ ム on に は RhAG の オ ー ソ ロ グ が 1 つ (fRhag), RhBG が 1 つ (fRhbg), RhCG が 2 つ fRhcgl, (2), そ れ ぞ れ exist す る こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ ら all molecular に つ い て ノ ー ザ ン parsing line を っ た as a result, the whole て の posthumous son 伝 が エ ラ に strong く 発 now し て い た. Time に こ れ ら の heritage 伝 son の tissues で の 発 now parts を Ming ら か に す る た め に, in situ hybridization を line っ た. Youdaoplaceholder0 そ as a result,Rhag pillar cellに,Rhbg and びRhcg2 <s:1> pavement cellに,Rhcg1 られた mitochondrion-rich cell(MRC)にそれぞれ occur が see られた. Line more に immune dyeing を っ た results, Rhag は pillar cell の ア ピ カ ル membrane と バ ソ ラ テ ラ ル membrane の struck square に bureau in す る こ と が Ming ら か に な っ た. Rhbg and び Rhcg2 は pavement cell の バ ソ ラ テ ラ ル membrane, ア ピ カ ル membrane に そ れ ぞ れ bureau in し て い た. The またRhcg1 また MRC <s:1> アピカ て membrane に is localized in the <s:1> て た た た た. ま た, こ れ ら の molecular が be interstate に ア ン モ ニ ア conveying active を hold つ か ど う か を confirm す る た め, ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes を with い た 発 now be 験 を line っ た. As a result, the transport activity of the entire て て molecule にメチ ア ア モニア モニア が was confirmed to be された. の above results か ら, Rh フ ァ ミ リ ー が bony fishes の エ ラ か ら の ア ン モ ニ ア discharge に important な "を cut fruit た し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Ammonia secretion from fish gill depends on a set of Rh glycoproteins

• DOI: 10.1096/fj.06-6834com
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: FASEB JOURNAL
• 影响因子: 4.8
• 作者: Nakada, Tsutomu;Westhoff, Connie M.;Hirose, Shigehisa
• 通讯作者: Hirose, Shigehisa