破骨細胞形成におけるRANK/TRAF6シグナルの解明及び骨疾患治療への応用

阐明破骨细胞形成中的 RANK/TRAF6 信号及其在骨病治疗中的应用

• 批准号: 18770169
• 负责人: 合田 仁
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770169/
• 关键词: シグナル伝達; 細胞・組織; 発生・分化; 骨疾患; 破骨細胞; サイトカインレセプター

骨吸収を担う破骨細胞の分化・活性化は、受容体RANK及びそれに結合するアダプター分子TRAF6によって制御されるが、RANK/TRAF6シグナルの分子機構には不明な点が多い。申請者は、昨年度の本研究課題において、TRAF6シグナルの増強を担い、破骨細胞分化誘導に必須であるRANK細胞質領域を発見した。本年度は、この領域の欠損RANK変異体を用いた解析及びこの領域への結合因子の同定を行うことにより、RANKによるTRAF6シグナル増強機構の解明を試み、以下の成果を得た。RANKのTRAF6シグナル増強領域を欠損させると、刺激初期における転写因子NFκBの活性化には影響がみられないが、野生型RANKで観察される長期にわたるNFκB活性化が消失した。さらに、野生型RANK及び欠損変異体の細胞内での局在を解析したところ、野生型RANKでは刺激後、細胞膜上から細胞内に取り込まれエンドソームに局在するのに対して、欠損変異体ではエンドソームに移行せず細胞膜上に局在したままであった。一方、TRAF6シグナル増強領域に結合する因子を、既知の破骨細胞形成制御因子の中から免疫沈降法により探索したところ、幾つかの結合因子を同定することができた。これらの結果から、RANKのシグナル増強領域は幾つかの結合因子を介してRANKのインターナリゼイションを促進させることで、TRAF6シグナルの増強を担っている可能性が示唆された。このことは、受容体の局在の変化がシグナルめ質を決定することを示しており、破骨細胞形成の分子機構の解明に新たな知見を与えるだけでなく、骨疾患治療における新しい分子標的の候補の発見に繋がると考えられる。

Bone resorption plays an important role in differentiation and activation of osteoclasts, receptor RANK and other binding mechanisms of TRAF6, and the molecular mechanisms of RANK/TRAF6 are unknown. The applicant responded to this research project last year, and found that TRAF6 was necessary for the induction of osteoclast differentiation. This year, the analysis and determination of the combination factor of the domain's loss RANK and the domain's enhancement mechanism were tested, and the following results were obtained. RANK TRAF6 increased activity in the early stages of stimulation and NFκ B activity disappeared in the long term. In addition, wild-type RANK and defective foreign cells are analyzed in this way. After stimulation of wild-type RANK, the intracellular membrane is removed from the cell membrane. In addition, defective foreign cells are removed from the cell membrane. The binding factors of TRAF6 and osteoclast formation inhibition factors were determined by immunoprecipitation method. The results show that the RANK's enhancement domain has the potential to increase the RANK's enhancement domain by increasing the binding factor. The study on the molecular mechanism of osteoclast formation and the candidate of molecular targets for bone disease treatment

项目成果

破骨細胞分化と胸線依存的な免疫寛容を制御するTRAF6シグナル

TRAF6信号控制破骨细胞分化和胸腺依赖性免疫耐受

• 发表时间: 2007
• 期刊: 骨・関節・靭帯 20
• 作者: Matsuyama A.;Arai R.;Yashiroda Y.;Shirai A.;Kamata A.;Sekido S.;Kobayashi Y.;Hashimoto A.;Hamamoto M.;Hiraoka Y.;Horinouchi S.;Yoshida M.;合田 仁
• 通讯作者: 合田 仁