ヒト卵巣癌組織および細胞株におけるADAMの発現と機能解析

ADAM在人卵巢癌组织和细胞系中的表达及功能分析

• 批准号: 18790255
• 负责人: 上野 万里
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790255/
• 关键词: 卵巣癌; ADAM; アミロイド前駆蛋白

ヒト卵巣癌組織および種々の組織型由来のヒト卵巣癌細胞株を用いて、ADAM分子の発現・機能解析を試みた。1.ヒト卵巣癌組織と細胞株におけるADAM分子の網羅的検討:外科的に切除された37例のヒト卵巣癌組織および8種のヒト卵巣癌細胞株からmRNAを抽出し、酵素活性を有するADAM分子の発現を定量PCRやRT-PCRで解析した結果、卵巣癌組織、細胞株ともにADAM9,10,17等の高発現傾向を認めた。卵巣癌組織では特に明細胞腺癌においてADAM9の有意な高発現を確認した。2.ヒト卵巣癌組織におけるADAM分子の臨床病理学的検討:上記手術症例のパラフィン切片を用いて免疫染色を行った結果、ADAM9,10,17の発現は腫瘍性上皮に局在していた。定量PCRにおけるこれらのADAM分子の発現量とMIB-1陽性率との間に有意な相関は見られなかったが、ADAM17の発現量と脈管侵襲およびリンパ節転移との間には正の相関が見られた。3.ヒト卵巣癌におけるアミロイド前駆蛋白(APP)の発現とADAM分子によるsheddingの検討:8種のヒト卵巣癌細胞株においてRT-PCRおよびWestern blotを行いAPPのを確認した。培養上清にはα-secretase分解産物であるsoluble APPαが分泌されており、この分泌はメタロプロテアーゼ阻害剤であるKB-R7785およびBB94により容量依存的に抑制された。ヒト卵巣癌においてADAM9,10,17など既知のα-secretaseの高発現が確認できており、これらのsheddingへの関与が示唆される。

The histotype of human ovarian cancer tissue and its origin, the development and function analysis of ADAM molecules were studied. 1. Study of ADAM molecular trap in ovarian cancer tissues and cell lines: 37 cases of ovarian cancer tissues were surgically excised and 8 kinds of ovarian cancer cell lines were analyzed by quantitative PCR and RT-PCR. ADAM molecular expression in ovarian cancer tissues and cell lines was highly expressed. The presence of ADAM9 in ovarian cancer tissue was confirmed. 2. Clinicopathological study of ADAM molecules in ovarian cancer tissues: the results of immunostaining of ADAM9,10 and 17 in surgical cases were reported. The quantitative PCR results showed that the expression of ADAM molecules was significantly higher than that of MIB-1, and the expression of ADAM17 was significantly higher than that of MIB-1. 3. Development of ADAM protein in human ovarian cancer cell lines and identification of APP by RT-PCR and Western blot. Soluble APPα, the breakdown product of α-secretase, is secreted in the culture supernatant, and this secretion is inhibited by the capacity-dependent inhibition of KB-R7785 and BB94. ADAM9,10,17, and the high levels of known α-secretase were confirmed.