アルツハイマー主病変因子アミロイドβに対するアストログリア反応機構の検索

寻找星形胶质细胞对阿尔茨海默病主要疾病因子淀粉样蛋白-β的反应机制

基本信息

批准号：
18790288
负责人：
木村展之
金额：
$ 2.24万
依托单位：
National Institute of Biomedical Innovation
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790288/
关键词：
アルツハイマー病アミロイドβ LGI3 膜融合輸送機能加齢製変化 siRNA 加齢性変化

项目摘要

本研究課題では前年度に引き続き,未だ生理学的機能が不明の因子・LGI3とアルツハイマー病(AD)病態との関係を検索している。前年度で得られた結果(LGI3は神経系細胞の細胞膜に局在するとともに,エンドサイトーシス関連因子と共在する)を基にして,ラット初代培養アストログリア細胞を用いて免疫細胞化学的検索を行った結果,LGI3がエンドサイトーシス輸送小胞であるearly endosomeに局在することを確認した。このことから、LGI3はそれ自身がエンドサイトーシスを受けて細胞膜から細胞内へと輸送されていることが明らかとなった。また,塩化アンモニウム等の薬剤処理によってエンドサイトーシスを阻害すると、全長LGI3のみならず切断型LGI3の細胞内蓄積が誘導され,前年度で確認されたカニクイザル脳組織でのLGI3蓄積が,加齢に伴うエンドサイトーシス機能の低下に起因するという仮説を支持する結果が得られた。LGI3の神経系細胞における機能を検索するため,siRNAを用いてLGI3の発現を人為的に低下させたラット・アストログリア細胞にAβ(AD主要原因蛋白の1つ)刺激を加えたところギLGI3の発現を低下させたアストログリア細胞ではAβの貧食機能が著しく阻害されるという結果が得られた。このことから,LGI3はアストログリア細胞によるAβ貧食機能に不可欠な因子の一つである可能性が示唆された(現在論文投稿中)。さらに,LGI3発現低下細胞ではAβのみならずTransferrinの細胞内取り込みも阻害されるごとを確認した。このことから,LGI3はAβ貧食機構特異的なエンドサイトーシスに関連する因子ではなく,神経系細胞でのエンドサイトーシス機能そのものに重要な役割を果たしている因子であるという可能性が示唆された(現在論文投稿中)。

在这个研究主题中，就像上一年一样，我们正在寻找具有未知生理功能的因子LGI3与阿尔茨海默氏病（AD）的病理学之间的关系。根据上一年获得的结果（LGI3位于神经系统细胞的细胞膜并与内吞作用相关因素共定位），我们使用原发性培养的大鼠星形胶质细胞进行了免疫细胞化学搜索，并确认LGI3局部到早期内体内体内，是内核的早期内生物体转运囊泡。这表明LGI3本身会经历内吞作用，并从细胞膜转运到细胞中。此外，通过用氯化铵等药物治疗抑制内吞作用，不仅诱导了细胞内积累，不仅是全长LGI3，而且还截断了LGI3，从而支持LGI3在上一年证实的LGI3在上一年证实的LGI3积累，这是由于年龄降低了局部落细胞的衰落。为了在神经系统细胞中搜索LGI3的功能，当Aβ（一种主要的AD病因蛋白之一）被刺激到大鼠星形胶质细胞上时，使用siRNA人为地降低LGI3表达时，Aβ的饮食功能较差就显着抑制了星体细胞中的Aβ，从而降低了LGI3的表达。这表明LGI3可能是星形胶质细胞（目前在本文中）的Aβ吸收功能的基本因素之一。此外，已经证实，在LGI3表达中，不仅抑制了Aβ，而且还抑制了转铁蛋白的细胞摄取。这表明LGI3不是与基于Aβ的呼吸机械特异性的内吞作用有关的因素，但可能是在神经系统细胞（目前在论文中）中内吞作用本身在内吞功能本身中起重要作用的因素。