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新規レセプターシグナル伝達を介したヒトパルボウイルスB19複製制御機構の解析

新型受体信号介导的人细小病毒B19复制控制机制分析

基本信息

批准号：
18790318
负责人：
伊藤貴子
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790318/
关键词：
パルボウイルスB19 エンドソームクラスリン依存性 Ku80

项目摘要

ヒトパルボウイルスB19(B19)は伝染性紅斑のほかに、成人での多発関節炎、自己免疫疾患様所見など多彩な臨床所見を惹起し、その感染動態、制御が臨床上重要である。しかし、in vitroでは感染性粒子を産生する系の確立が困難で、感染、細胞内増殖の分子機序は不明である。昨年度の研究でB19がエンドソーム内へ取り込まれることを明らかとしたが、本年度はエンドソームへ取り込まれる過程の解明を進めた。赤芽球系細胞株UT7/Epo-S1はB19高感受性細胞株であるが、継代により感染効率が低下するため、限界希釈法でクローニングを続け高感受性クローンを用いて感染実験を行った。B19の細胞内への取り込みはクラスリン依存性エンドサイトーシス阻害剤であるクロルプロマジン存在下で濃度依存性に抑制された。また抗クラスリン重鎖抗体を用いた蛍光免疫染色で蛍光ラベルした精製B19ウイルスとの共局在が確認された。またウイルスの中にはカベオラ依存性に取り込まれるものもあるが、UT7/Epo-S1は抗カベオリン抗体で染色されず、カベオラにより取り込まれる可能性は低いと考えられた。蛍光ラベルした精製B19ウイルスはエンドソームと共局在が観察されたが、一部はライソゾームマーカーであるLAMP2との共局在が確認され、エンドソームからライソゾームへ移行するウイルスも存在することが判明した。またバフィロマイシンを用いた実験からB19感染成立にはエンドソームの酸性下が必要であることが明らかとなった。B19はクラスリン依存性にエンドソーム内へ取り込まれ、エンドソーム酸性下のもとに感染が成立することを明らかとした。

ヒトパルボウイルスB19 (B19) erythema contaminans, adult polyarthritis, self Immune diseases are seen in various ways, clinical manifestations are caused, infections are dynamic, and control is clinically important. It is difficult to establish the system for the production of infectious particles in vitro, and the molecular mechanism of infection and intracellular proliferation is unknown. Last year's research was completedとしたが、This year's はエンドソームへtake the り込まれる process の解明を进めた. The infection efficiency of the red bud cell line UT7/Epo-S1 and B19 high-susceptibility cell lines であるが and 継Shiro によりLow するため, limit limit 燈法でクローニングを続けhigh sensitivity クローンを use いて infection 実験を行った. B19 Intracellular Intracellular Dependence System It is a concentration-dependent inhibitory effect in the presence of inhibitory substances. The anti-ククラスリン relocked antibody was purified by the いた蛍photoimmunostaining で蛍光ラベルしたウイルスとの国产拍 and confirmed by された. UT7/Epo-S1 There is a low possibility of staining anti-カベオリリン antibody and カベオラにより taking the り込まれる and the test is low.荍光ラベルした Refined B19ウイルスはエンドソームと total The Bureau is in the が観看されたが, the first part is the はライソゾームマーカーであるLAMP2's common game is confirmed and confirmed.またバフィロマイシンをいた実験からB19 infection was established にはIt is necessary to use acid under acidic conditions. B19はクラスリンdependencyにエンドソーム内へtakeり込まれ、エンドソームAcidic under-のもとに infectionがestablishmentすることを明らかとした.