权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

哺乳類概日リズム制御機構における視交叉上核の領域特異性の解明

阐明哺乳动物昼夜节律控制机制中视交叉上核的区域特异性

基本信息

批准号：
18790173
负责人：
足立明人
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Saitama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

哺乳類概日リズム制御機構における視交叉上核の領域特異性の解明のため、まず、体内時計の中枢である視交叉上核と末梢器官の一つである肝臓の両方で遺伝子発現に概日リズムが見られる遺伝子の機能解析を行った。その一つであるId2のノックアウトマウスを用いた実験の結果、Id2^<-/->マウスの恒明条件での行動量の減少はId2が時計遺伝子のPer1の抑制因子として働き、その抑制因子が欠失したため引き起こされたという結論に至った。次に、機能未知の遺伝子の機能スクリーニングに重要な系の確立をするため、in vitro細胞系においてmiR RNAiを用いた機能抑制実験を行った。Per2プロモーターに1uciferaseが繋がったモニターベクターを内在したC6細胞において、安定的にRNAiを発現する細胞株を用いてluciferaseの発光リズムを経時的に測定した。その結果、ある遺伝子の機能抑制により、発光リズムが完全に抑制することが明らかとなった。これらの結果より、調べた遺伝子が少なくともPer2の発現に非常に重要な役割を示すだけでなく、一過性発現よりRNAiの発現量が劣る安定発現株でもその効果を確認することができた。このことはmiR RNAi発現系を移植した遺伝子改変マウスを用いた実験においても効果を発揮する可能性が高く、今後領域特異的に機能解析を可能にする非常に有効な方法であると考えられる。

Mammalian regulatory mechanisms: domain specificity of suprachiasmatic nucleus, domain specificity of supra-chiasmatic nucleus, domain specificity of supra-chiasmatic nucleus, domain The results of the implementation of the Id2 and the reduction of the action amount of the constant light condition of the Id2 and the inhibition factor of the Per1 of the time-dependent calculation are as follows: Secondly, important lines were established for the functional cloning of genes with unknown functions, and functional suppression was achieved through the use of miR RNAi in vitro cell lines. The expression of p16-p16-p16 As a result, the function of the gene is inhibited, and the light is completely inhibited. The results of this study are as follows: 1. The expression of RNAi is very important for the development of Per2. 2. The expression of RNAi is very important for the development of Per 2. 3. The expression of RNAi is very important for the development of Per 2. 4. The expression of RNAi is very important for the development of Per 2. 3. This miR RNAi discovery system is highly likely to be transplanted, modified, and used in the future, and domain-specific functional analysis is possible in the future.