卵巣癌に特異的に発現する蛋白の発現調節解析と悪性化・予後への作用機序の解明

卵巢癌特异性表达蛋白的表达调控分析及其恶性进展及预后的作用机制

• 批准号: 18790377
• 负责人: 東 朋美
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790377/
• 关键词: LTBP-1L; SNP; 卵巣癌; 術後生存率; RNAi干渉; TGF-b1; 一塩基多型; 転写活性; TGF-β1; 予後

卵巣癌は近年増加しているが,リスクファクターとなる生活習慣や環境要因が特定されず,早期発見も難しいため悪性化しやすい癌として知られる。代表者らは卵巣癌で高発現しているLTBP-1L(Latent TGF-β Binding Protein-1L)に着目して解析を進めてきた(Higashi T, et. al.2001)。昨年度までに,LTBP-1L遺伝子のプロモーター配列上に新規の一塩基多型(SNP)を発見し,遺伝子型が転写因子Sp1との結合力に影響し,LTBP-1L蛋白の発現量に有意な差が生じること,さらに特定のSNPの存在が癌症例の術後生存率の低下と相関することを明らかにした(Higashi T, et. al.2006)。本年度は癌細胞で発現したLTBP-1L蛋白の役割と作用機序を明らかにするために, まず卵巣癌培養細胞株JHOM-1において, RNA干渉によるLTBP-1Lの発現抑制を試みた。LTBP-1LのsiRNAを3種類設計し,種々の導入条件をリポフェクション法により検討した結果,LTBP-1L mRNA発現を90%抑制する条件を見い出した。そしてWST-1を用いたアッセイにより,LTBP-1L遺伝子の発現を抑制すると,細胞増殖と生存能が減少することがわかった。したがって,癌細胞で高発現しているLTBP-1Lは,細胞増殖能の活性化を通じて,癌の悪性化に寄与している可能性が示唆された。そこで次にLTBP-1L cDNAの全長を含む4287bpをpIRESneo3ベクター(clontech)に組み込み,細胞でLTBP-1Lを強制発現させるための発現ベクターを構築した。今後この発現ベクターを用いた強制発現実験とRNAi干渉による発現抑制実験により,LTBP-1L機能解析を進めていく必要がある。

In recent years, there has been an increase in the number of patients with ovarian cancer, and the environment of ovarian cancer has to be recognized in the early stage due to specific environmental conditions. The representative, Higashi T, et (Latent TGF- β Binding Protein-1L), focuses on the diagnosis of ovarian cancer (Higashi T, et). Al.2001). Last year, LTBP-1L children were assigned to the list of new gene polymorphisms (SNP), subtype writing factors (Sp1), protein binding capacity (LTBP-1L), protein levels (LTBP-1L), and specific SNP (Higashi T, et.) Al.2006). This year, the sequence of LTBP-1L protein cleavage in cancer cells was clear, the cell line JHOM-1 was positive in egg cancer culture, and the inhibition test was detected in LTBP-1L. There are three types of LTBP-1L siRNA settings, and a variety of input conditions are used to analyze the results of the test. LTBP-1L mRNA has achieved 90% suppression of the failure of health conditions. When you use the word "WST-1", you can see that the inhibition is bad, and that the cellular colonization can be reduced. If you don't, you can't survive. The cancer cells are high, the cancer cells are high, the cells are LTBP-1L, the colonies are active, and the cancer cells are susceptible to the possibility of cancer. The overall length of the secondary LTBP-1L cDNA includes the 4287bp pIRESneo3 transmission (clontech) system, and the cell LTBP-1L force you to make sure that you are aware of the changes in the system. In the future, it will be possible to use the system to strengthen the performance of the RNAi system, and the LTBP-1L machine will be able to analyze the necessary information.

项目成果

Novel Functional Single Nucleotide Polymorphisms in the Latent TGF-β Binding Protein1-L(LTBP-1L) Promoter. Effect on LTBP-1L expression level and possible prognostic significance in Ovarian Cancer.

潜在 TGF-β 结合蛋白 1-L (LTBP-1L) 启动子中的新型功能性单核苷酸多态性对 LTBP-1L 表达水平的影响以及卵巢癌中可能的预后意义。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Molecular Diagnostics 8巻3号
• 作者: Higashi T;Kyo S;Inoue;M;Tanii H;Saijoh K
• 通讯作者: Saijoh K

遺伝子多型およびその用途

遗传多态性及其用途

• 发表时间: 2007

Ecophysiological analysis of halophilic bacteriain bioaerosol

生物气溶胶中嗜盐细菌的生态生理学分析

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Maki;S. Susuki;F. Kobayashi;M. Kakikawa;M. Yamada;T. Higashi;C. Hong;Y. Tobo;H. Hasegawa;K. Ueda;Y. Iwasaka
• 通讯作者: Y. Iwasaka

Purpurin expression in the zebrafish retina during early development and after optic nerve lesion in adults

斑马鱼视网膜在早期发育过程中和成年视神经损伤后的红紫素表达

• 发表时间: 2007
• 期刊: Brain Res. 1153
• 作者: Tanaka;M.
• 通讯作者: M.