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Hsp70の神経保護作用 -Bax translocationの抑制-

Hsp70 的神经保护作用 - 抑制 Bax 易位 -

基本信息

批准号：
18791010
负责人：
土谷大輔
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Yamagata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791010/
关键词：
Hsp70 脳虚血アポトーシス

项目摘要

脳虚血後の内因系apoptosisの経路としてはミトコンドリアからのCytochrome c放出が始まりと考えられていたが、近年細胞贊内のBax等のpro・apoptotic. factorがミトコンドリアにtranslocationし、cytochrome cの放出を促すことが明らかとなった。HSP70は細胞質内タンパクであるため、我々はHSP70が細胞質内でBaxに直接作用し、 Baxの細胞質からミトコンドリアへのtrans locationを抑制することによcytochormeの放出を抑制し、apoptqsis cascadeを抑制すると仮説を立て実験を行った。局所脳虚血モデルは、これまで同様、intraluminal suture modelによる局所脳虚血モデルを作成、30分閉塞後の再開通モデルを使用した。免疫染色でぽミトコンドリアではなく組胞質にあるcytochrome cを特異的に染色することができ、Baxとcytochrome cの二重染色を行い、 Baxの細胞質からミトコンドリアへのtranslocationの時間経過について定性的評価を行った。また、 Western blottingではBaxとcytochrom cを用いて再開通後30min,1時間、2時間、4時間、8時間の各タイムコースで比較を行った。結果、Western blottingにおいて、 wild typeでは各時間でのcytochrome cの細胞質への流出、細胞質内からミトコンドリアへのBaxのtranslocationを経時的に示すことができた。しかしながら、densitometryでのHSP70 transgenic miceとの比較では、 wild tipeと比較し、HSP70 transgenicmiceではBaxの細胞質からミトコンドリアへのtranslocationが抑制させる傾向を認めたものの、有意差は認めなかった。これは虚血時間が30分と短いことが原因である可能性があり、45-60分閉塞を行えば有意差が得られる可能性が考えられた。

The internal cause of deficiency of blood is apoptosis, and the release of Cytochrome c is the beginning of apoptotic. The factor is that the cell is located in the middle of the cell, and the cytochrome c is released. HSP70 directly affects cytosolic Bax and inhibits cytosolic Bax release and trans location. HSP70 inhibits cytosolic Bax release and apoptqsis cascade. The original color of the film is the same as the original color of the film. The original color of the film is the same as the original color of the film. The original color of the film is the same as the original color of the film. Immunostaining: Cytochrome c specific staining, Bax cytochrome c double staining, Bax cytochrome c time lapse qualitative evaluation. 30min after re-opening,1 time, 2 time, 4 time, 8 time for each of the three types of cells. Results: Western blotting and wild type showed that the cytoplasmic efflux of cytochrome c and the cytoplasmic translocation of Bax were different at different times. HSP70 transgenic rice, compared with HSP70 transgenicrice, has a tendency to inhibit the translocation of Bax, compared with HSP70 transgenicrice, compared with HSP70 transgenicrice.これは虚血时间が30分と短いことが原因である可能性があり、45-60分钱红を行えば有意差が得られる可能性が考えられた。