脳虚血によるニューロン死惹起機構に関わる新規因子の探索・同定

脑缺血神经元死亡机制中新因子的寻找和鉴定

• 批准号: 13771364
• 负责人: 上原 孝
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771364/
• 关键词: ニューロン; アポトーシス; PI 4-キナーゼ; 脳虚血; ラット; ディファレンシャル・ディスプレイ法; Pl 4-キナーゼ; 遺伝子

ラットに四血管閉塞/再灌流を行い,一過性前脳虚血モデルを作成して,脳虚血に伴って発現量の変化する遺伝子をディファレンシャル・ディスプレイ法を用いて単離することを試み,減少する遺伝子としてphosphatidylinositol 4-kinase (PI 4-K)の同定に成功した.PI 4-Kの発現の変化を詳細に検討したところ,PI 4-K蛋白質は海馬ニューロンに多く発現していること,また,虚血に伴って細胞死が起こるCA1領域においては,細胞死が観察される前に先んじて減少することがわかった.さらに,ノーザンブロット解析から,PI 4-K mRNAは脳虚血1日後から有意に減少することが明かとなった.また,細胞死が起こらない海馬CA3ならびに歯状回において,PI 4-Kの変化は認められなかった.また,培養神経芽細胞腫に低酸素ストレスを負荷するとアポトーシス様の細胞死が観察されるが,その際にもPI 4-Kの著明な減少が認められた.さらに,PI 4-Kの過剰発現は有意に低酸素による細胞死を抑制したこと,キナーゼ活性を有しない優性抑制変異型PI 4-Kには細胞死抑制効果はないことから,PI 4-Kの酵素活性が重要であることが示唆された.低酸素ストレスによって細胞は死から免れるために,細胞死抑制シグナルであるAktを活性化させる.PI 4KはAktの活性化を増強・維持することがわかった.したがって,PI 4Kの脳虚血/低酸素による減少は細胞死抑制シグナルを減弱させ,その結果,ニューロン死が惹起する可能性が推定された.

ラットにFour-vessel occlusion/reperfusion を row い, transient former blood deficiency モデルをmade して, 脳deficiency blood にassociated with って発current amount の変化 する伝子 をディファレンシャル・ディスプレイ法を用いて単利することをtrialみ, reduce する伝子としてphosphatidylinositol 4-Kinase (PI 4-K)の同定に成した.PI 4-Kの発现の変化をDetailsに検问したところ,PI 4-K protein は海马ニューロンに多く発appears していること, また, asthenia of blood にassociated with ってcell death がrise こるCA1 domain においては,cell death が観看される前に前に前することがわかった.さらに,ノーザンブロットanalytic から,PI 4-K After 1 day of hypoemia, the mRNA is decreased intentionally, the cells are dead, the hippocampus CA3 is reduced, and the PI 4-K の変化はcognitionめられなかった.また, cultured nerve bud cell tumor に low acid content ストレスを load するとアポトーシス様のCRELL DEATH が観看されるが,その记にもPI 4-K の 明な REDuce が cognizance められた.さらに, PI 4-K has been shown to be low in acidity, inhibits cell death, and inhibits the activity of 4-K, which can inhibit heterogeneous PI 4-K cell death inhibitory effect, PI 4-K enzyme activity is important.は死から无れるために, cell death inhibition シグナルであるAktをactivationさせる.PI 4K Akt activation, enhancement and maintenance, PI 4K's blood deficiency/hypoacidemia reduces cell death, inhibits cell death, weakens cells, results in death, causes death, and presumes the possibility of death.

项目成果

Ko et al.: "Role of ubiquilin associated with protein-disulfide isomerase in the endoplasmic reticulum in stress-induced apoptotic cell death"Journal of Biological Chemistry. 277,38. 35386-35392 (2002)

Ko等人：“内质网中与蛋白质二硫键异构酶相关的泛素在应激诱导的细胞凋亡中的作用”生物化学杂志。