p21による活性酸素産生系と癌細胞死誘導能との関連の解析

p21介导的活性氧产生系统与诱导癌细胞死亡能力的关系分析

• 批准号: 18791160
• 负责人: 井上 貴史
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791160/
• 关键词: p21; 活性酸素種; HDAG-I; 細胞老化死; Apoptosis; 癌細胞老化死

【目的】Sodium Butyrate(NaB)は腸内細菌によって、食物繊維が発酵することで産生される短鎖脂肪酸で、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤(HDAC-I)に分類される。さまざまな癌細胞株でアポトーシスを誘導し、低濃度のNaB処理では婦人科癌細胞株で細胞老化死を誘導することが報告されている。NaBにおける癌細胞死誘導においてCDKインヒビターであるP21の誘導がG1もしくはG2 arrestに深く関与することが報告されているが、詳細な分子機構に関しては不明な点が多い。また細胞老化には活性酸素種(ROS)が関与することが報告されている。本研究では、NaBによる癌細胞死誘導能と細胞内ROSとの関与を検討し、その作用機構を解明することを目的とした。【方法】1)子宮頸癌細株Hela細胞、大腸癌細胞株HCT116細胞の2株を用いて、さまざまな濃度のNaBで処理を行った。2)細胞周期変化をFACS法、細胞老化誘導能をβ-gal染色、細胞内ROSレベルを蛍光色素である(ACF)を用いてFACS法で解析した。3)DNA double strain break(DSB)のマーカーである、ATMやγ H2AXなどの蛋白発現量の変化をWestern Blotting法で解析した。【成績】1)低濃度のNaB添加において、G1期あるいはG2/M期の増加とβ-ga1染色陽性細胞の増加を認め、細胞老化死が誘導された。高濃度のNaB添加では、両株ともsubG1期の増加を認め、apoptosisの誘導が示唆された。2)NaBによる癌細胞死誘導時に細胞内ROSの増加を認めた。3) NaBによる癌細胞死誘導時にATM、γH2AXの蛋白発現量の増加を認めた。【結論】1) NaBは低濃度で細胞老化、高濃度でapoptosisを誘導した。2) NaBによる癌細胞死誘導時には細胞内ROSレベルが上昇するとともにDSBのシグナルの関与が示唆された。

[目的]丁酸钠（NAB）是一种由肠道细菌发酵饮食纤维产生的短链脂肪酸，并被归类为组蛋白脱乙酰基酶抑制剂（HDAC-I）。据报道，凋亡是在多种癌细胞系中诱导的，低浓度的NAB治疗可诱导妇科癌细胞系中的细胞衰老死亡。据报道，CDK抑制剂p21的诱导诱导NAB中的癌细胞死亡与G1或G2停滞深度参与，但是关于详细的分子机制有许多未知数。还报道了活性氧（ROS）参与细胞衰老。这项研究旨在研究NAB及其细胞内ROS诱导癌细胞死亡的参与，并阐明作用机理。方法1）使用宫颈癌菌株HeLa细胞和结肠癌细胞菌株HCT116细胞用各种浓度的NAB处理两种菌株。 2）通过FACS方法分析细胞周期的变化，通过β-gal染色细胞衰老能力，并使用荧光染料（ACF）通过FACS方法分析细胞内ROS水平。 3）使用蛋白质印迹方法分析了蛋白质表达水平（例如ATM和γH2AX）的变化，它们是DNA双应变断裂（DSB）的标记。 [结果] 1）当在低浓度下添加NAB时，观察到G1或G2/M期的增加以及β-GA1染色的阳性细胞的增加，导致细胞衰老死亡。在两种菌株中，高浓度的NAB均显示出SUBG1相的增加，表明凋亡诱导。 2）当NAB诱导癌细胞死亡时，观察到细胞内ROS的增加。 3）当NAB诱导癌细胞死亡时，观察到ATM和γH2AX的蛋白表达水平升高。 [结论] 1）NAB在低浓度和高浓度下诱导的细胞衰老。 2）通过NAB诱导癌细胞死亡增加了细胞内ROS水平，表明DSB信号参与。

项目成果

p21発現に伴う細胞内活性酸素種の変化と癌細胞死誘導能との解析

分析与 p21 表达相关的细胞内活性氧变化以及诱导癌细胞死亡的能力

• 发表时间: 2007
• 作者: 本原研一;永吉裕三子;本原研一;井上 貴史;井上 貴史
• 通讯作者: 井上 貴史

進行子宮頸癌における前斜角筋リジパ節生検術の検討

晚期宫颈癌前斜角肌淋巴结活检的思考

• 发表时间: 2007
• 作者: 本原研一;永吉裕三子;本原研一;井上 貴史
• 通讯作者: 井上 貴史