酵母人工染色体遺伝子導入マウスを用いたゲノム刷り込み確立の解析

使用酵母人工染色体转基因小鼠进行基因组印记分析

基本信息

  • 批准号:
    07J01878
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.11万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2007
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2007 至 2009
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ゲノム刷り込みを受けるIgf2/H19遺伝子座において刷り込み発現を規定する制御領域H19 ICRは、ゲノムの由来する親の性依存的なDNAメチル化(刷り込みメチル化)によって活性が制御される。本研究では、H19 ICRの刷り込みメチル化がいかにして確立・維持されるのか、そのメカニズムを解明することを目的として遺伝子導入マウス(TgM)を用いた以下の解析を行った。1.H19 ICR DNA断片のみを用いて複数系統のTgMを作製し、H19 ICRの機能の自律性を検証した結果、体細胞において導入ICRの刷り込みメチル化が再現されたことから、用いたH19 ICR DNA領域内にメチル化を指令する十分な情報が存在することが明らかになった。また、体細胞における導入ICRの刷り込みメチル化は、精子におけるDNAメチル化状態非依存的に受精後に確立しうること、精子における導入ICRのメチル化にはICR外の配列も関与している可能性があること、が明らかになった。2.CTCF結合配列を欠損させた変異型H19 ICRを酵母人工染色体上でヒトβ-globin遺伝子座に挿入し、これを用いてTgMを作製した。同TgMにおいて、着床前胚では変異型導入ICRの刷り込みメチル化が認められたが、着床後胚及び成熟個体の体細胞では導入ICRが由来する親の性に関わらず高度にメチル化されていた。この結果から、CTCF結合配列は、導入ICRにおける受精後刷り込みメチル化の「確立」には必須ではないが、その後の母由来ICRの非メチル化状態の「維持」に重要であることが示唆された。
The Igf2/H19 gene locus contains the gene expression regulation domain H19 ICR and the gene origin regulation domain DNA expression regulation domain. In this study, H19 ICR was used to establish and maintain the mechanism of gene transfer (TgM). 1. H19 ICR DNA Fragment and Application in Multiple Systems TgM Control, H19 ICR Function Autonomy Test Results, Somatic Cell Introduction ICR DNA Fragment and Application in Multiple Systems TgM Control, H19 ICR Function Autonomy Test Results, Somatic Cell Introduction ICR DNA Fragment and Application in Multiple Systems TgM Control, H19 ICR Function Autonomy Test Results, Somatic Cell Introduction ICR DNA Fragment and Application in Multiple Systems TgM Control, H19 ICR Function Autonomy Test Results, Somatic Cell Introduction ICR and Application in Multiple Systems TgM Control, H19 ICR DNA Fragment and Application in Multiple Systems In addition, the introduction of somatic cells into ICR may result in the establishment of independent post-fertilization, sperm introduction into ICR, and the possibility of ICR external alignment. 2. CTCF binding sequence is deficient in heterotypic H19 ICR and is controlled by β-globin loci on yeast artificial chromosomes. The same TgM, preimplantation embryos and somatic cells of mature individuals were introduced into ICR with high degree of heterotypic transformation. The result is that CTCF binding alignment is important for the establishment of ICR after fertilization and for the maintenance of ICR after fertilization.

项目成果

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专利数量(0)
Post-fertilization methylation imprinting in the randomly integrated transgenic H19-ICR fragment
随机整合的转基因 H19-ICR 片段中的受精后甲基化印记
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Matsuzaki;H.;Tanimoto;K.
  • 通讯作者:
    K.
YAC遺伝子導入マウスを用いたH19遺伝子刷り込み制御領域の機能解析
YAC转基因小鼠H19基因印记控制区的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    松崎仁美;谷本啓司;松崎仁美
  • 通讯作者:
    松崎仁美
Acquisition of parent-of-origin-specific methylation in the transgegnic mouse carrying 2. 9-kbp H19 ICR DNA fragment
携带 2. 9-kbp H19 ICR DNA 片段的转基因小鼠中获得亲本特异性甲基化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hitomi Matsuzaki;Keiji Tanimoto
  • 通讯作者:
    Keiji Tanimoto
ヘテロな遺伝子座を用いた刷り込み制御領域の機能解析
使用异源位点进行印记控制区的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    松崎仁美;谷本啓司
  • 通讯作者:
    谷本啓司
A Randomly Integrated Transgenic H19 Imprinting Control Region Acquires Methylation Imprinting Independently of Its Establishment in Germ Cells
  • DOI:
    10.1128/mcb.00275-09
  • 发表时间:
    2009-09-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.3
  • 作者:
    Matsuzaki, Hitomi;Okamura, Eiichi;Tanimoto, Keiji
  • 通讯作者:
    Tanimoto, Keiji
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  • 通讯作者:
    平川 勝彦

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