マウス配偶子形成過程でのゲノム刷り込みの変動

小鼠配子发生过程中基因组印记的变化

• 批准号: 08275201
• 负责人: 高木 信夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08275201/
• 关键词: ゲノム刷り込み; EG細胞; ES細胞; 生殖細胞; 胚様体; T16H転座

1.EG細胞における刷り込みについては鋭意検討中であるが昨年より十分進んだ結果は得られなかった。2.マウスSearle転座の隣接2型分離の結果生じた不均衡な核型、40(X,X^<16>,16,Y)を持つES細胞TMA17での検討を更に進めた。浮遊培養開始後24時間目には、胚様体の表面の細胞ばかりでなく、内部の細胞も形態的に完全に未分化状態を失っていた。未分化細胞に発現されるOct3、分化細胞に発現するEndo遺伝子の発現の調査により、TMA17細胞の速やかな分化が確認された。また、レクチンとの反応性は内胚葉ばかりでなく、栄養細胞(trophoblast)への分化の可能性も示唆する。現在、栄養細胞特異的遺伝子の発現を調査中である。15EA03:3.2種類のロバートソン型X/常染色体転座、Rb2とRX9、を持つ雌マウスより得られる胚の発生を調査した。この雌ではX染色体の不分離が起こるので、XXYとXXX胚が高頻度で得られる。母由来X染色体はepiblast以外では不活性化しないようimprintされているので、その影響の検討を意図した。目的の胚は約12%の頻度で得られたが、その他にも注目すべき発生異常を示す胚が認められた。単層柱状上皮であるembryonic ectodermが、あたかも接着能を失ったかのように、着床後1日目の5.5日目胚の時期に原羊膜腔にこぼれ出てしまう。同時にEmbryonic ectodermを包むvisceral endodermは本来細胞同士がtight junctionによって緊密に結合しているはずであるが、結合が失われ崩壊が進んでいる。5.5-6.5日胚では出現率は約20%である。平均的に出現するとすれば-腹毎に1-2頭となるはずであるが、実際には0と4以上が期待よりも多い。異常胚の核型は正常で、遺伝様式は明らかではないが、精子由来で発現が抑制されるimprint遺伝子の関与も否定できない。中胚葉形成の前提になる、発生初期の極めて重要なイベントの異常なので検討を続ける価値はあろう。ES細胞株を樹立することによって培養下での解析を可能にする予定である。

The 1.EG cell said that there was a significant improvement in the number of people in the market last year. The results showed that it was very bad last year. two。 The Searle seat is connected to the type 2 isolates and the karyotype is not balanced. The karyotype of 40 (X, X ^ & lt;16>,16,Y) is higher than that of the ES cell TMA17. At 24 hours after the start of floating culture, the cell cycle on the surface of the embryo, the complete undifferentiated state of the inner cell and the cell cycle of the embryo were observed. The undifferentiated cells showed Oct3, the differentiated cells showed Endo cells, the TMA17 cells showed rapid differentiation, and the differentiation was confirmed. The possibility of differentiation is instigated by the possibility of differentiation of endodermis and trophoblast. At present, the child of the special cell is in the middle of the accident. 15EA03:3.2 type X

项目成果

Mise, N. et al.: "Activation of the inactive X chromosome induced by cell fusion between a murine EC and female somatic cell accompanies reproducible changes in the methylation pattern of the Xist gene." Experimental Cell Research.223. 193-202 (1996)

Mise, N. 等人：“小鼠 EC 和雌性体细胞之间的细胞融合诱导的失活 X 染色体的激活伴随着 Xist 基因甲基化模式的可重复变化。”

Takagi, N.: "Mouse embryonal carcinoma cell-somatic cell hybrids as experimental tools for the study of cell differentiation and X chromosome activity." Cancer Genetics and Cytogenetics. (in press). (1997)

Takagi, N.：“小鼠胚胎癌细胞-体细胞杂交体作为研究细胞分化和 X 染色体活性的实验工具。”

Yoshida, I. et al.: "The Mcmd gene for DNSA replication protein P1MCM3 maps to bands A3-A5 on chromosome 1 by fluorescence in situ hybridization." Genomics. 32. 483-484 (1996)

Yoshida, I. 等人：“通过荧光原位杂交，DNSA 复制蛋白 P1MCM3 的 Mcmd 基因定位到 1 号染色体上的 A3-A5 条带。”

Nishida, Y. et al.: "Genomic imprinting and chromosomal localization of the human MEST gene." Genomics. 36. 539-542 (1996)

Nishida, Y. 等人：“人类 MEST 基因的基因组印记和染色体定位。”

Sado, T. et al.: "Mosaic methylation of Xist gene before chromosome inactivation in undifferentiated female mouse embryonic stem and embryonic germ cells." Developmental Dynamics. 205. 421-434 (1996)

Sado, T. 等人：“未分化雌性小鼠胚胎干细胞和胚胎生殖细胞中染色体失活前 Xist 基因的马赛克甲基化。”