進化工学的手法による分子モーターのメカニズムの研究

利用进化工程方法研究分子马达的机理

基本信息

  • 批准号:
    07J03080
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2007
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2007 至 2008
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

分子モーターの運動メカニズムを探るため,進化分子工学の手法を用いて分子モーターの一種であるキネシンに変異を導入し,運動能を獲得したり,運動方向を逆転させるようなセレクションを行って,新たな機能をもった分子の種類を数多く得るという実験系を構築することを目標とし研究を行った.まず,分子モーターが一方向に運動するという性質が本質的に重要であるので,天然に存在するマイナス端方向性キネシンを昨年に引き続き調べた.マイナス端方向性キネシンのPkl1について米国誌Journal of Biological Chemistryに投稿していたものがrevisionで返ってきたため,追加の実験を行い,出版することが出来た.これにより,昨年出版した論文と併せて考えると,マイナス端方向性キネシンがマイナス端方向性キネシンの中で共通した性質を持ち,プラス端方向性キネシンとは異なる運動性を持っていることが示唆された.分子のセレクションに先立って,T7ファージに提示したキネシン分子が微小管上を運動できることが分かった.このことにより,キネシン分子を,その運動能によって選択することが可能であることがわかった.また,試験管内タンパク合成法により,キネシンの微小管結合部位にアミノ酸特異的にランダムな変異を入れる方法を確立した.現在,mRNAを回収する過程を最適化している.また,次のステップである,選択と進化を行うステップに必要なガラス基板の作製を行った.タンパク質-DNA複合体の非特異的なガラスへの吸着を防ぐため,ポリエチレングリコール(PEG2000)をガラス基板に高密度に生やし,必要な分子を特異的に結合することに成功した.目標とする進化サイクルを実行するところまでは到達しなかったが,進化サイクルを回す実験系の準備が全て整った.
The molecular engineering method is used to explore the molecular motion, and the molecular motion can be obtained. The molecular motion direction is reversed. The molecular motion system is constructed. A molecule moves in one direction and its properties are essential. Pkl1, Journal of Biological Chemistry, Journal of Biological Chemistry. The paper was published last year and the common property of the end directivity was maintained. The molecular structure of the molecule is similar to that of the T7 molecule. The motion energy of the molecule is determined by the number of particles in the molecule. In addition, the method of synthesis of microtube-binding sites in the microtube-binding sites was established by the method of synthesis of microtube-binding sites in the microtube-binding sites. Now, the mRNA retrieval process is optimized. For example, if you want to make a decision, you can choose to make a decision. Non-specific adsorption of DNA complexes into substrates containing PEG (PEG2000) was successfully performed at high density and specific binding of essential molecules. The goal is to complete the evolution of the system.

项目成果

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专利数量(0)
数を制御した nonprocessive なモータータンパク質による力発生と processivity
通过受控数量的非加工运动蛋白产生力和进行加工
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    古田健也;豊島陽子
  • 通讯作者:
    豊島陽子
Minus-end-directed motor ncd exhibits processive movement that is enhanced by microtubule bundling in vitro
  • DOI:
    10.1016/j.cub.2007.12.056
  • 发表时间:
    2008-01-22
  • 期刊:
  • 影响因子:
    9.2
  • 作者:
    Furuta, Ken'ya;Toyoshima, Yoko Yano
  • 通讯作者:
    Toyoshima, Yoko Yano
Processive movement by a defined number of nonprocessive motor proteins
由一定数量的非进行性运动蛋白进行的进行性运动
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    古田健也;豊島陽子
  • 通讯作者:
    豊島陽子
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古田 健也其他文献

Kinesin 6 Klp9 promotes microtubule elongation during anaphase B through motor-dependent and -independent manners
驱动蛋白 6 Klp9 通过运动依赖性和独立性方式促进后期 B 微管伸长
  • DOI:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
    湯川 格史
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  • DOI:
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    古田 健也;鳥澤 嵩征;豊島 陽子
  • 通讯作者:
    豊島 陽子
Diffusive Component in Directed Movements of Cytoplasmic Dynein
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    鳥澤 嵩征;古田 健也;大岩 和弘;小嶋 寛明
  • 通讯作者:
    小嶋 寛明
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    湯川 格史;古田 健也;登田 隆
  • 通讯作者:
    登田 隆

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