TGF-βによる抑制性T細胞産生機構の解明

阐明 TGF-β 抑制 T 细胞产生的机制

• 批准号: 07J06188
• 负责人: 有木 宏美 (高木 宏美)
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University (2008)Kyushu University (2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J06188/
• 关键词: 抑制性T細胞; Foxp3; TGF-β; IL-4; STAT6; TGFβ; インターロイキン4; STAT; プロモーター; 転写調整; クロマチン; 免疫沈降; レチノイン酸

TGF-βは経口免疫寛容を担うとされるTh3細胞や末梢におけるFoxp3+抑制性T細胞の誘導に関わる。そこで申請者はFoxp3の発現制御機構を明らかにするためにFoxp3プロモーターについてレポーターアッセイ、クロマチン免疫沈降法を用いて解析を行った。Foxp3プロモーター領域にはTGF-βの下流で働くSmadの結合配列が存在しており、この結合配列がTGF-βにより誘導されるFoxp3の発現に重要であることが示唆された。また、IL-4がTGF-βにより誘導されるFoxp3の発現をmRNAレベルで抑制することを見出した。IL-4の作用を検討するためIL-4シグナル伝達を担うSTAT6の欠損マウスを用いてFoxp3の誘導を行ったところ、WT由来のT細胞ではFoxp3の発現がday3をピークとし、その後Foxp3の発現が低下するのに対し、STAT6欠損マウス由来のT細胞ではFoxp3の発現低下が見られなかった。そこでFoxp3誘導条件下でのT細胞の培養上清のIL-4を測定したところ、day3よりIL-4の産生がみられた。また、抗IL-4抗体存在下でWT由来のT細胞を抑制性T細胞誘導条件下で培養したところ、day3以降にみられたFoxp3の発現低下が阻害された。このことから抑制性T細胞誘導条件下でT細胞を培養した際にday3以降に見られるFoxp3の発現低下はIL-4が原因であることが示唆された。さらにFoxp3プロモーターにはSTAT6結合配列が存在しておりSTAT6がこの配列に結合することが明らかとなった。IL-4存在下で抑制性T細胞を誘導するとこのSTAT結合配列近辺のクロマチン構造が閉じ、Foxp3の転写が抑制されていることを示した。Th1サイトカインであるIFN-γや炎症性サイトカインであるIL-6もFoxp3の発現を抑制することが報告されている。今回の研究によりTh2サイトカインであるIL-4/STAT6もFoxp3の発現を抑制することが明らかとなった。これらのことより抑制性T細胞の分化・誘導にはサイトカインシグナルのバランスが重要な役割を担っていることが明らかとなった。

TGF-β is involved in the induction of Th3 cell endings and Foxp3 + inhibitory T cells. The applicant shall analyze the Foxp3 discovery control mechanism by using the Foxp3 immune precipitation method. Foxp3 protein domain is important for the expression of TGF-β downstream Smad binding sequences, which are induced by TGF-β. The expression of Foxp3 mRNA was inhibited by IL-4 and TGF-β. The role of IL-4 in the induction of Foxp3 in STAT6 is discussed. T cells derived from STAT6 are responsible for Foxp3 expression on day3, and Foxp3 expression on day 3 is reduced. T cells derived from STAT6 are responsible for Foxp3 expression on day 3. IL-4 production in T cell culture supernatant under Foxp3 induction was measured on day3. In the presence of anti-IL-4 antibody, WT derived T cells were inhibited by T cell induction conditions. The reason why Foxp3 expression is lower in T cell culture under inhibitory T cell induction conditions Foxp3 is the only one with STAT6. In the presence of IL-4, inhibitory T cells are induced, and STAT binding is closely related to the structure of T cells, and Foxp3 binding is inhibited. IFN-γ, IL-6, Foxp3, and IL-6 inhibit the production of Th1, IL-6, Foxp3, IL-6, and IL-6. This paper studies the expression of IL-4/STAT6 and Foxp3 in mice. The differentiation and induction of inhibitory T cells are important for the development of T cells.

项目成果

TCRシグナル強度はTh17/iTregバランスの決定に重要である

TCR 信号强度对于确定 Th17/iTreg 平衡很重要

• 发表时间: 2007
• 作者: 高木宏美;ほか
• 通讯作者: ほか

STAT6 inhibits TGF-beta 1-mediated Foxp3 induction through direct binding to the Foxp3 promoter, which is reverted by retinoic acid receptor.

STAT6 通过直接结合 Foxp3 启动子来抑制 TGF-β 1 介导的 Foxp3 诱导，而视黄酸受体可逆转该启动子。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Biol Chem. 283(22)
• 作者: Takaki H;Ichiyama K;Koga K;Chinen T;Takaesu G;Sugiyama Y;Kato S;Yoshimura A;Kobayashi T
• 通讯作者: Kobayashi T