乳酸菌による花粉症発症抑制効果とFOXP3のエピジェネティック制御機構

初めに、アレルギーの主な原因物質であるヒスタミンを発生させるマスト細胞への乳酸菌の直接的作用を明らかにするための実験を行った。今回はIgE受容体が高発現しているKU812細胞を使用した。IgE受容体(α、γ)のmRNA発現量における乳酸菌の影響をReal time PCRによりスクリーニングした。IgE受容体(α、γ)のmRNA発現量は血清Freeの培地にすることで高発現させた。スクリーニングの結果、乳酸菌Pediococcus sp. Aがより効果的にIgE受容体(α、γ)のmRNA発現量を抑制することが明らかになった。次に、アレルギー関連遺伝子(Dock5、CD40LG)のmRNA発現量を定量した。その結果、乳酸菌Pediococcus sp. Aの濃度依存的にDock5、CD40LGのmRNA発現量は減少した。一方で、乳酸菌Pediococcus sp. AはKU812細胞の24、48、72時間後の生存率に影響を与えなかった。加えて、A23187およびPMAにより誘導したリン酸化ERKの発現量は、乳酸菌Pediococcus sp. Aにより減少した。さらに、マスト細胞において脱顆粒の際に上昇するセカンドメッセンジャーである細胞内Ca2+濃度を測定した。細胞内Ca2+濃度はA23187およびPMAにより誘導した。細胞内Ca2+は、乳酸菌Pediococcus sp. Aの濃度依存的に減少した。この研究において、乳酸菌のマスト細胞における直接的な作用を明らかにすることは粘膜や皮膚に直接乳酸菌を塗布した際の作用を予測する上で、重要且つ意義のあることである。

初めに、アレルギーの主な原因物質であるヒスタミンを発生させるマスト細胞への乳酸菌の直接的作用を明らかにするための実験を行った。今回はIgE受容体が高発現しているKU812細胞を使用した。IgE受容体(α、γ)のmRNA発現量における乳酸菌の影響をReal time PCRによりスクリーニングした。IgE受容体(α、γ)のmRNA発現量は血清Freeの培地にすることで高発現させた。スクリーニングの結果、乳酸菌Pediococcus sp. Aがより効果的にIgE受容体(α、γ)のmRNA発現量を抑制することが明らかになった。次に、アレルギー関連遺伝子(Dock5、CD40LG)のmRNA発現量を定量した。その結果、乳酸菌Pediococcus sp. Aの濃度依存的にDock5、CD40LGのmRNA発現量は減少した。一方で、乳酸菌Pediococcus sp. AはKU812細胞の24、48、72時間後の生存率に影響を与えなかった。加えて、A23187およびPMAにより誘導したリン酸化ERKの発現量は、乳酸菌Pediococcus sp. Aにより減少した。さらに、マスト細胞において脱顆粒の際に上昇するセカンドメッセンジャーである細胞内Ca2+濃度を測定した。細胞内Ca2+濃度はA23187およびPMAにより誘導した。細胞内Ca2+は、乳酸菌Pediococcus sp. Aの濃度依存的に減少した。この研究において、乳酸菌のマスト細胞における直接的な作用を明らかにすることは粘膜や皮膚に直接乳酸菌を塗布した際の作用を予測する上で、重要且つ意義のあることである。