魚類精子形成におけるセルトリ細胞制御因子の解明

鱼类精子发生中支持细胞调节因子的阐明

• 批准号: 07J07238
• 负责人: 尾崎 雄一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J07238/
• 关键词: 精子形成; ゼブラフィッシュ; セルトリ細胞; 生殖細胞; マイクロアレイ; 精巣; ウナギ

これまでに、ゼブラフィッシュを用いて精子形成の進行に伴い発現が増加する分泌性因子をマイクロアレイにより検索した結果、エピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9が精子形成を制御する候補因子として得られている。精巣培養系が確立されているウナギを用いることにより両因子の機能解析を行うため、本年度はまず、ニュージーランドショートフィンウナギエピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9c DNAのクローニングを引き続き行い、その全塩基配列を決定した。次にin situハイブリダイゼーションによりウナギ精巣での局在を調べた結果、エピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9ともにセルトリ細胞でのみその発現が認められた。さらにヒト絨毛性生殖腺刺激ホルモン投与により成熟を誘導した後、各発達段階の精巣を摘出しin situハイブリダイゼーションに供した結果、精原細胞の増殖が開始された直後の投与後10日目の精巣で最も強いエピモルフィンの発現が認められた。さらに未成熟精巣器官培養系を用いて、エピモルフィンの発現に及ぼす濾胞刺激ホルモン(FSH)および魚類の雄性ホルモンである11-ケトテストステロン(11KT)の影響を調べた。FSHおよび11KT添加後5日間培養した精巣のエピモルフィン発現量をreal-time PCRにより測定した結果、FSHおよび11KTの添加濃度依存的に発現量が増加した。以上の結果、精子形成の開始時期にFSHの刺激により精巣で産生された11KTがエピモルフィンのセルトリ細胞での発現を誘導すること、エピモルフィンが精子形成初期を制御する因子の一つであることが示唆された。

これまでに, ゼブラフィッシュをいて sperm formation の carry out partner The secretion factor is increasedたRESULT, エピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9がSperm formationをControlするCandidate factorとして gotられている. The establishment of the semen culture system, the functional analysis of the factor and the functional analysis of the factor, and the current year's performance , ニュージーランドショートフィンウナギエピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9c DNA's のクローニングをinduced き続き行い, その全桩array をdetermination した. timesエピモルフィンおよびマトリックスメタロプロテアーゼ9ともにセルトリcell でのみその発 appear められた. After さらにヒトvillous gonad stimulation ホルモン is injected into により mature を induction した, the semen of each stage is extracted しin The result of situ pregnancy and the start of spermatogonia reproduction 10 days after the direct investment, the essence of the eye is the strongest and the strongest. The さらに immature sperm organ culture system uses いて, エピモルフィンの発成に and ぼすfilter cell stimulation ホルモン (FS H) および鱼の Male ホルモンである11-ケトテストステロン (11KT) の Impact を Adjustment べた. FSHおよび11KT was added and cultured for 5 days. Real-time The result of PCR test measurement and FSH test 11KT's added concentration-dependent increase in the amount of test results. The results of the above, the stimulation of FSH during the initial period of sperm formation, the production of spermatozoa, and the production of 11KT がエピモルフィンのセルトリThe cells are showing signs of inducing sperm and controlling factors in the early stages of spermatogenesis.