生体調節因子による甲殻類の卵黄形成制御機構の解明

生物调节因子阐明甲壳动物卵黄发生的控制机制

• 批准号: 07J07593
• 负责人: 筒井 直昭
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J07593/
• 关键词: 甲殻類; クルマエビ; ペプチドホルモン; 立体構造; 卵黄形成; ホルモン; 甲殻類血糖上昇ホルモン族ペプチド

本研究課題では、生体調節因子によるクルマエビの卵黄形成制御機構の解明を目的としている。本年度は昨年度より引き続きCHH族ペプチドの1つであるPej-SGP-Iの立体構造をX線結晶構造解析によって明らかにし、ペプチドの構造と卵黄形成抑制活性との相関を明らかにすることを試みた。大腸菌発現系を用いることで、rSGP-I(C末端アミド型、高活性)、rSGP-I-Gly(C末端グリシン付加型、C末端アミド型の前駆体で低活性)、およびrSGP-I-OH(C末端カルボキシル基型、低活性)についてセレノメチオニル化したペプチドを大量に調製し、結晶化した。得られた結晶を用いてSPring-8またはPhoton FactoryにおいてX線回折データを取得し、単波長異常分散法または多波長異常分散法により構造解析を行った。その結果rSGP-I-OHの結晶構造を1.6Å分解能で決定することができた。C末端側の8残基については相当する電子密度が得られなかったことから、この部分は特定のフォールドを有していない可能性が考えられた。このC末端部分以外のフォールドは、同じCHH族ペプチドで脱皮抑制活性を示すSGP-IVと類似していた。rSGP-I-GlyとrSGP-IもrSGP-I-OHとほぼ同様の構造であった。rSGP-I-OHとrSGP-I-Glyは結晶中および溶液中で2量体として存在する一方、高活性型のrSCP-Iは結晶中では2量体として、溶液中では単量体として存在することが分かった。この結果の一部について日本農芸化学会2010年度大会にて報告した。

The purpose of this study is to clarify the regulation mechanism of vitellogenesis by biological regulatory factors. This year, compared with the previous year, the three-dimensional structure of Pej-SGP-I was analyzed by X-ray crystallography, and the correlation between structure and vitellogenesis inhibition activity was tested. Escherichia coli development system is mainly composed of rSGP-I(C-terminal variant, high activity), rSGP-I-Gly(C-terminal variant, C-terminal variant precursor, low activity), rSGP-I-OH(C-terminal variant, low activity) X-ray diffraction analysis was carried out by using SPring-8, single-wavelength anomalous dispersion method and multi-wavelength anomalous dispersion method. As a result, the crystalline structure of rSGP-I-OH can be determined by a decomposition energy of 1.6 Ω. The electron density of the 8 residues on the C-terminal side is equivalent to that of the 8 residues on the C-terminal side, and the electron density of the 8 residues on the C-terminal side is equivalent to that of the 8 residues on the C-terminal side. The anti-desquamation activity was similar to that of SGP-IV except for the C-terminal part. rSGP-I-Gly rSGP-I rSGP-I-OH rSGP-I-OH and rSGP-I-Gly are present in two quantities in crystals and in solution, while highly active rSCP-I is present in two quantities in crystals and in solution. A report on the results of the 2010 Annual Meeting of the Japan Agricultural Chemical Society

项目成果

組換え甲殻類血糖上昇ホルモン族ペプチドの作製とその卵黄形成抑制活性

重组甲壳动物降血糖激素家族肽的制备及其卵黄发生抑制活性

• 发表时间: 2008
• 作者: 福島翠;大平剛;泉進;筒井直昭;長澤寛道;朝比奈潔;筒井 直昭・永井 千晶・永田 晋治・長澤 寛道
• 通讯作者: 筒井 直昭・永井 千晶・永田 晋治・長澤 寛道

クルマエビ血糖上昇ホルモンの立体構造に関する研究

对虾升血糖激素三维结构的研究

• 发表时间: 2010
• 作者: J.Sook Chung;Nilli.Zmora;Hidekazu.Katayama;Naoaki.Tsutsui;筒井直昭・永田宏次・井上宏隆・永井千晶・永田普治・田之倉優・長澤寛道
• 通讯作者: 筒井直昭・永田宏次・井上宏隆・永井千晶・永田普治・田之倉優・長澤寛道

組換え甲殻類血糖上昇ホルモン族ペプチドの作製と結晶化

重组甲壳类高血糖激素家族肽的制备及结晶

• 发表时间: 2009
• 作者: 筒井直昭;井上宏隆;永田宏次;田之倉優;長澤寛道
• 通讯作者: 長澤寛道

成熟に伴うクルマエビのサイナス腺中の卵黄形成抑制ホルモン活性の変動

黑虾成熟过程中窦腺卵黄生成抑制激素活性的变化

• 发表时间: 2009
• 作者: 福島翠;大平剛;泉進;筒井直昭;長澤寛道;朝比奈潔
• 通讯作者: 朝比奈潔