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減数分裂特異的エンドサイトーシスの発見とその分子メカニズムの解明

减数分裂特异性内吞作用的发现及其分子机制的阐明

基本信息

批准号：
07J10738
负责人：
柏崎隼
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J10738/
关键词：
分裂酵母エンドサイトーシス減数分裂 GFP 細胞膜 SNARE 小胞輸送アクチン

项目摘要

本研究は分裂酵母の胞子形成において細胞膜上のシンタキシンPsy1が「減数分裂特異的エンドサイトーシス」により胞子の細胞膜となる前胞子膜へ局在を変化させるメカニズムを遺伝学的、分子細胞生物学的、生化学的に明らかにすることを目的として行った。これにより小胞輸送研究に新たな知見を与えるものと思われる。本年度は研究実施計画に示したストラテジー(S1〜S3)に沿って研究を進めた。S1のライブイメージングについてはYFP-Psy1、CFP-tubulinの同時観察系によりPsy1の取り込み時期、速度などを定量的に示すことに成功した。また、Dendra2を用いたPhotoconversionの実験系を構築し、細胞膜上のシンタキシンPsy1が前胞子膜へ移っていることを示唆する結果を得た。さらに、Psy1が選択的に取り込まれることに関連し、様々な細胞膜タンパク質やエルゴステロールの細胞膜上での局在パターンを解析し、減数分裂時に取り込まれるものがステロールリッチな膜ドメインに存在することを明らかにした。S2の逆遺伝学的な解析により取得できた変異株におけるPsy1の局在変化欠損をエンドサイトーシス欠損とともに詳細に解析し、I型ミオシンMyo1、フィンプリンFim1が胞子形成時により重要であることを見出し、減数分裂時のエンドサイトーシスが栄養増殖時のものと性質が異なり、より強固でダイナミックなアクチンメッシュワークを必要とすることが考えられた。以上の成果は投稿準備中であり、本年中に国際誌に投稿予定である。

In this study, the meiosis specific cell membrane and presporic membrane structure of yeast during spore formation were studied in genetic, molecular cell biological and biochemical fields. A study on cellular transport is presented. This year's research is planned to be carried out along the lines of S1 ~ S3. S1's speed profile includes YFP-Psy1, CFP-tubulin and simultaneous detection system. Psy1's acquisition period, speed profile and quantitative indication are successful. Dendra2 was used to construct a Photoconversion system, and the results of cell membrane migration were obtained. Psy1 is selected for analysis of the cell membrane structure, and the cell membrane structure is selected for analysis of the cell membrane structure. S2 reverse genetics analysis, acquisition of different plants, Psy1 in the transformation of the lack of loss, detailed analysis, type I Myo1, Psy 1, Spore formation, important, when the emergence of meiosis, when the development of different nature, It is necessary to strengthen the system and improve the quality of service. The above achievements are in preparation for submission, and the international journal is scheduled for submission in the middle of this year.