甲殻類の卵黄形成調節機構の解明と人為起源化学物質の影響評価に関する体系的研究

甲壳类卵黄发生调控机制的系统研究及人为化学物质效应评价

• 批准号: 07J13363
• 负责人: 平野 将司
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Prefectural University of Kumamoto
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J13363/
• 关键词: 甲殻類; Mysid; 環境化学物質; 卵黄タンパク質; Vitellogenesis; 幼若ホルモン; Fenoxycarb; エクジステロイド; Ecdysone receptor

本研究では、海産の小型甲殻類アミ(Mysid crustacea;Americamysis bahia)を対象として、卵巣成熟に密接な関係を示す卵黄タンパク質前駆体(ビテロゲユン,Vtg)の一次構造を明らかにすること、また卵黄形成機構に対する環境化学物質の影響評価を行うことを目的とした。本年度は、卵黄タンパク質のアミノ酸配列自体を解析した。甲殻類のVtgはsubtilisin認識配列が存在し、エンドプロテアーゼによって複数の卵黄タンパク質(ビテリン,Vn)へ切断され、卵母細胞に蓄積される。そこで、個体発生に必要な栄養源として卵黄タンパク質を蓄積している未受精卵を試料とし、卵黄タンパク質のアミノ酸配列決定を試みた。未受精卵抽出試料をSDS-PAGEに供したところ、推定分子量89kDaの位置に主たるバンド、58kDaの位置に比較的明瞭なバンドを形成した。これらのN末端アミノ酸配列を決定したところ、それぞれ10残基のアミノ酸配列が得られ、ホモロジー検索から、LLTPs(脂質伝達タンパク質)スーパーファミリーに属することが明らかとなり、アミVtg一次構造の一部を明らかにした。また、抗アミ卵関連タンパク質抗体を作製し、幼若ホルモン様物質fenoxycarbを曝露したアミの雌特異的タンパク質の発現をウェスタンブロッティングにより調べたところ、これらの個体では推定分子量89kDaのタンパク質発現が減少しており、性成熟の遅延が惹起されることを明らかにした。すなわち、このタンパク質はアミVtgの一部であることから、アミVtg産生は幼若ホルモンによる制御を受けるものと推察された。以上のことから、不明な点が多い甲殻類の内分泌調節機構の重要な基礎的知見が得られ、化学物質の生態影響評価に使用可能である抗体作製に成功した。

This study was conducted to investigate the relationship between egg maturation and environmental chemistry in Mysid crustacea (Americamysis bahia) and vitelline precursor (Vtg). This year, the yolk protein was analyzed by acid coordination. The Vtg subtilisin recognition sequence of crustaceans exists, and multiple vitelline (Vn) cleavage and oocyte accumulation occur. For example, if an egg is unfertilized, it is necessary for the individual to develop a nutrient source and to accumulate egg yolk and determine the acid allocation of egg yolk. Samples extracted from unfertilized eggs were provided for SDS-PAGE, and a clear comparison was made between the main position with the estimated molecular weight of 89kDa and the position with the estimated molecular weight of 58kDa. The N-terminal amino acid sequence is determined by determining the amino acid sequence of the 10 residues. The amino acid sequence is determined by determining the amino acid sequence of the 10 residues. The amino acid sequence is determined by determining the amino acid sequence of the 10 residues. The amino acid sequence is determined by determining the amino acid sequence of the 10 residues. The amino acid sequence is determined by determining the amino acid sequence of the 10 residues. In addition, the production of anti-egg-related protein antibodies and the development of female-specific protein in individuals with putative molecular weight of 89kDa were reduced due to exposure to fenoxycarb, a young protein substance, and delayed onset of sexual maturity. A part of the Vtg is generated by the control system. The above points are unclear, and many of them are important for the understanding of crustaceans 'endocrine regulatory mechanisms. The ecological impact assessment of chemicals and the possible use of antibodies are successful.

项目成果

Expression analysis of ecdysone receptor and ultraspiracle mRNA through molting period in mysid crustacean, Americamysis bahia.

糠虾甲壳类美洲虾蜕皮期蜕皮激素受体和超气门 mRNA 的表达分析。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Proceeding for International Symposium on Biological Responses to Chemical Pollutants: Toward Establishing an Asian Network of Environmental Toxicology. (in press)
• 作者: Hirano;M.
• 通讯作者: M.

ヒメダカ肝臓中エストロゲンおよびプレグナンX受容体シグナル伝達系に及ぼす多環ムスク化合物の影響評価

多环麝香化合物对日本青鳉鱼肝脏雌激素和孕烷X受体信号系统影响的评价

• 发表时间: 2008
• 作者: 山内良子;石橋弘志;金俊佑;平野将司;森大樹;有薗幸司
• 通讯作者: 有薗幸司

Expression analysis of ecdysone receptor and ultraspiracle mRNA through molting period in mysid crustacean, Americamysis bahia

糠虾蜕皮期蜕皮激素受体和超气孔 mRNA 的表达分析

• 发表时间: 2008
• 期刊: Proceeding for Interdisciplinary Studies on Environmental Chemistry : Biological Responses to Chemical Pollutants Vol.1
• 作者: M. Hirano;H. Ishibashi;R. Yamauchi;J. W. Kim;K. Arizono
• 通讯作者: K. Arizono

Toxicity to early life stages on medaka (Oryzias latipes) and in vitro estrogen intensity of bisphenol compounds

• DOI: 10.11403/jset.11.133
• 发表时间: 2008-12
• 期刊: Japanese journal of environmental toxicology
• 作者: K. Yokota;C. Kato;M. Hirano;Hiroshi Ishibashib;H. Shiratsuchi;K. Tachibana;K. Arizono

ヒメダカ cyclooxygenase (COX) 遺伝子発現に及ぼすNSAIDsの影響

NSAIDs 对青鳉环氧合酶 (COX) 基因表达的影响

• 发表时间: 2008
• 作者: 金俊佑;石橋弘志;山内良子;平野将司;有薗幸司
• 通讯作者: 有薗幸司