プラスミノゲンモジュレーターの生理機能解析

纤溶酶原调节剂的生理功能分析

• 批准号: 07J45124
• 负责人: 奈良崎 律子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J45124/
• 关键词: plasminogen; conformation; fibrolysis; プラスミノゲン; コンフォメーション; アンジオスタチン; 線溶; 血管新生

SMTPとプラスミノゲン(PLG)のin vitroでの詳しい作用機序の解析を行った。SMTPは、PLGのコンフォメーションを変化させ、PLGのフィブリンへの結合を促進すると共に、PLGアクチベータによるプラスミンへの変換(プラスミノゲンの活性化)も促進する。SMTP-7投与によりin vivoでのプラスミンが約5倍増加していることが確定できた。また、このプラスミンの増加はPLGアクチベータ依存的であることが、exo vivoでの実験により分かった。これより血栓溶解作用の作用機序の一つはプラスミン変換の促進によるものであることが強く示唆された。循環型Glu-PLGはN末端ペプチド(NTP)と5つのクリングルドメイン(K)とセリンプロテアーゼドメインで構成されおり、NTPとK5の分子内結合により、タイトなコンフォメーションをもち、PLGアクチベータによるPmへの変換(PLG活性化)に抵抗性である。しかし、血栓や細胞表面にPLGがK5を介して結合すると、分子内結合が解除され効率的にPLGの活性化が行われる。このように、PLGのコンフォメーション変化は局所的プロテオリシスの制御に重要な役割を果たしている。そこで、SMTPとPLGの相互作用を解析するために、NTPを欠いたLys-PLG,K1-K4を欠いたmini-PLG,プロテアーゼドメインだけをもつμ-PLGを作製、精製しそれぞれのPLGに対するSMTP-7の作用を解析した。フィブリンへの結合、PLGの活性化およびPmの自己消化を指標として解析した。その結果、いずれの活性に対しても、Glu-,Lys-,mini-PLGでは促進が認められたが、μ-PLGには影響を与えなかった。SMTP-7が影響を与える最小単位はK5を含むmini-PLGであることよりSMTP-7は(1)K5依存的にコンフォメーション変化を誘導し、PLGの活性化を促進する。(2)リジン結合部位とは違う部位に作用するためフィブリンへの結合を阻害しないとういう特性を持つことが分かった。また、SMTP-7の作用はNaCl依存的にPLGを活性化すなわち生理条件下において特異的に促進作用があることが分かった。

SMTPとプラス ノゲ ノゲ ノゲ (PLG) <s:1> in vitroで <s:1> detailed <s:1> mechanism sequence <e:1> analysis を line った. SMTP は, PLG の コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン を variations change さ せ, PLG の フ ィ ブ リ ン へ の combining を promote す る と に, PLG ア ク チ ベ ー タ に よ る プ ラ ス ミ ン へ の variations in (プ ラ ス ミ ノ ゲ ン の activeness) も promote す る. SMTP - 7 shots and に よ り in vivo で の プ ラ ス ミ ン が about 5 times raised plus し て い る こ と が determine で き た. ま た, こ の プ ラ ス ミ ン の raised plus は PLG ア ク チ ベ ー タ dependent で あ る こ と が and exobiology vivo で の be 験 に よ り points か っ た. <s:1> れよ the process of thrombolytic action <s:1> sequence of action <s:1> one プラス プラス プラス プラス <s:1> transformation <s:1> promotion による <s:1> である である とが strong く inhibition された. Circular Glu - PLG は N terminal ペ プ チ ド (NTP) と 5 つ の ク リ ン グ ル ド メ イ ン (K) と セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ ド メ イ ン で constitute さ れ お り, NTP と K5 の intramolecular combining に よ り, タ イ ト な コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン を も ち, PLG ア ク チ ベ ー タ に よ る Pm へ の variations in activity (PLG) Youdaoplaceholder0 resistance である. し か し, thrombosis, や cell surface に PLG が K5 を interface し て combining す る と, intramolecular combining が remove さ れ sharper rate に PLG の activeness が line わ れ る. こ の よ う に, PLG の コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン variations of は bureau プ ロ テ オ リ シ ス の suppression に important な "を cut fruit た し て い る. そ こ で, SMTP と PLG の interaction を parsing す る た め に, NTP を owe い た Lys - PLG, K1 - K4 を owe い た mini - PLG, プ ロ テ ア ー ゼ ド メ イ ン だ け を も つ mu - PLG を system, refined し そ れ ぞ れ の PLG に す seaborne る SMTP - 7 の role を parsing し た. Youdaoplaceholder0 へ へ フィブリ combination, activation of PLG <e:1> および self-digestion of Pm を index と て analysis た. そ の results, い ず れ の active に し seaborne て も, Glu, Lys, mini - PLG で は promote が recognize め ら れ た が, mu - PLG に は influence を and え な か っ た. SMTP - 7 が influence を and え る 単 a smallest は K5 を containing む mini - PLG で あ る こ と よ り SMTP - 7 は dependent on (1) K5 に コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン - induced し を, PLG の activeness を promote す る. (2) リ ジ ン combining site と effect に う は spare part す る た め フ ィ ブ リ ン へ の combining を resistance against し な い と う い う features を hold つ こ と が points か っ た. ま た, SMTP - 7 の は NaCl dependent に PLG を activeness す な わ ち physiological conditions に お い て specific に promotes が あ る こ と が points か っ た.

项目成果

プラスミノーゲンモジュレーターSMTPの作用機序解析

纤溶酶原调节剂SMTP的作用机制分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 奈良崎律子;他
• 通讯作者: 他

プラスミノーゲンモジュレーター orniplabin の作用機序解析

纤溶酶原调节剂orniplabin的作用机制分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 奈良崎律子;小出治輝;白石晴久;蓮見恵司
• 通讯作者: 蓮見恵司

Glucose-dependent active ATP depletion by koningic acid kills high-glycolytic cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.10.199
• 发表时间: 2008-01-11
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Kumagai, Shohei;Narasaki, Ritsuko;Hasumi, Keiji
• 通讯作者: Hasumi, Keiji

プラスミノーゲンモジュレーターSMTPの構造活性相関

纤溶酶原调节剂 SMTP 的构效关系

• 发表时间: 2007
• 作者: 奈良崎律子;他
• 通讯作者: 他

プラスミノーゲンモジュレーターSMTPの新規化合物

纤溶酶原调节剂 SMTP 的新型化合物

• 发表时间: 2007
• 作者: 小出治輝;他
• 通讯作者: 他