2D-DIGE技術を用いたADAHファミリープロテアーゼ標的分子の網羅的解析

利用2D-DIGE技术全面分析ADAH家族蛋白酶靶分子

• 批准号: 07J45205
• 负责人: 白壁 恭子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J45205/
• 关键词: ADAMファミリー; シェディング; 2D-DIGE; LPS; マクロファージ

私は膜貫通型で細胞外領域にプロテアーゼ領域を持つADAMファミリーメタロプロテアーゼによる膜蛋白質の選択的な分解とそれに伴う細胞外領域の可溶化(シェディング)に興味を持っており、新しいADAMファミリーの基質を探すために二次元電気泳動を用いたプロテオミクス技術によりスクリーニングを行っています。これまでの研究からグラム陰性菌の細胞壁成分であるLPSをマクロファージ細胞に加えた際にシェディングを受ける蛋白質として複数の二次元電気泳動上のスポットを見出していました。本年度はこれらのスポットから蛋白質の同定を行い、複数の膜蛋白質がLPS刺激を受けたマクロファージで選択的にシェディングされる事を明らかにする事が出来ました。これらの膜蛋白質の中にはこれまでADAMファミリーの基質とは報告されていない物も含まれており、プロテオミクス技術によるバイアスをかけないスクリーニングがADAMファミリーによってシェディングされる蛋白質を知る上で有効である事が示されました。またADAMファミリーによるシェディングがエンドサイトーシスに影響を与えるという予期しない事実を示唆する結果を得る事も出来ました。この結果は今回のスクリーニングがADAMファミリーの持つ新たな生理機能を明らかにする上でも極めて有効である事を示しています。今後同様のスクリーニングを他の系に応用する事によって、ADAMファミリーの役割を更に明らかにしたいと考えています。

Private membrane-penetrating type extracellular domain ADAM domain control system Decomposition of selected membrane proteins and solubilization of extracellular areasしいADAMファミリーの matrix をExploration すために二Dimensional electrophoresis technology is developed using the technology of Dimensional Electrophoresis. Research on cell wall components of negative bacteria, LPS cellsにシェディングをReceived けるprotein として plural の二dimensional electrophoresis on のスポットを见出していました. This year's protein and membrane proteins are stimulated by LPS.けたマクロファージで选択的にシェディングされる事を明らかにする事が出ました. ADAM membrane protein membrane protein matrix membrane protein Report on the technical details of the companyイアスをかけないスクリーニングがADAMファミリーによってシェディングされるprotein を知る上で Effective である事が Show されました.またADAMファミリーによるシェディングがエンドサイトーシスに影The effect is the result of the sound and the expected result.このRESULTS Physiological function is very effective and effective. From now on, I will be doing the same thing with him, A DAM's ファミリーのservice cut に明らかにしたいと卡えています.