加齢に伴う基礎免疫力低下の分子機構の解明

阐明与年龄相关的基础免疫力下降的分子机制

• 批准号: 07J45139
• 负责人: 浅井 あづさ (氏家 あづさ)
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute for Longevity Sciences,NCGG
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J45139/
• 关键词: zizimin2; CDM family; cdc42; 樹状細胞; 獲得免疫応答; モノクローナル抗体; CDMファミリー; 免疫老化

我々はテロメラーゼとzizimin2という加齢に伴い発現変化する二つの分子の機能解析を通じて、加齢に伴う免疫機能低下のメカニズムの解明にアプローチしていきたいと考えている。今回、我々が樹立したzizimin2モノクローナル抗体を用いて獲得免疫応答時の抗原提示において非常に重要な樹状細胞におけるzizimin2の機能解析を行った。我々はzizimn2の生化学的な機能解析を進めるために、zizimin2を特異的に認識するモノクローナル抗体を作製した。得られた抗体は、ウェスタンブロッティングと免疫組織染色において強制発現させたzizimin2と内在性のzizimin2の両者を特異的に検出した。次に樹状細胞におけるzizimin2の機能について検討を行った。野生型の樹状細胞を抗FcγRII/III抗体(2.4G2)あるいはLPSあるいは抗CD40抗体(FGK)で刺激し活性化させたときのzizimin2の発現変化についてウェスタンブロッティング法を用いて比較検討を行った。結果、抗FcγRII/III抗体あるいはLPSで刺激したときにzizimin2の発現上昇が認められたが、一方、抗CD40抗体で刺激した時にはzizimin2の発現に変化は認められなかった。この結果から、zizimin2はFcγRあるいはTLR4の下流に存在することが示された。さらに免疫組織染色により詳細な検討を行ったところ、未刺激の樹状細胞において、zizimin2は細胞質と細胞膜に局在し、抗FcγRII/III抗体で刺激した時では、細胞質と細胞膜に存在するzizimin2の発現が増強し、特に細胞膜での発現増強が観察された。以上のことからzizimin2はPHドメインを介して細胞膜に局在し、cdc42を活性化することでFcγRあるいはTLR4からのシグナルに関与していることが示唆された。

我们想通过对年龄，端粒酶和Zizimin2变化的两个分子的功能分析来阐明与年龄相关的免疫功能下降机制。在本文中，我们使用了我们建立的Zizimin2单克隆抗体来分析Zizimin2在树突细胞中的功能，这对于在获得的免疫反应过程中对于抗原表现非常重要。为了进行Zizimn2的生化功能分析，我们创建了一种专门识别Zizimin2的单克隆抗体。所得的抗体通过蛋白质印迹和免疫组织化学染色特异性检测到强制表达的Zizimin2和内源性Zizimin2。接下来，研究了Zizimin2在树突状细胞中的功能。刺激野生型树突状细胞并用抗FCγRII/III抗体（2.4G2），LPS或抗CD40抗体（FGK）激活Zizimin2的表达变化。结果，当用抗FCγRII/III抗体或LPS刺激时，观察到Zizimin2表达的增加，但是当用抗CD40抗体刺激时，Zizimin2表达没有变化。这些结果表明Zizimin2位于FcγR或TLR4的下游。此外，通过免疫组织化学染色进行了详细的研究。在未刺激的树突状细胞中，Zizimin2位于细胞质和细胞膜中，当用抗FCγRII/III抗体刺激时，Zizimin2在细胞质和细胞膜中存在的Zizimin2表达增强，尤其是在Zizimin2的表达，尤其是在Zizizimin2的表达，尤其是在细胞膜上的表达。以上表明Zizimin2通过pH结构域定位于细胞膜，通过激活Cdc42，它参与了来自FcγR或TLR4的信号。

项目成果

Zizimin2(DOCKII)のモノクローナル抗体の樹立と樹状細胞における機能解析

Zizimin2（DOCKII）单克隆抗体的建立及树突状细胞功能分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 上田 啓貴;三浦 英生;上田 啓貴;Nobuki Ueta;Nobuki Ueta;上田 啓貴;竹田 香織;竹田 香織;竹田 香織[邦訳](スザンナ・クレペリオ[著]);名畑太智;名畑太智;磯田 典和;磯田 典和;磯田 典和;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Azusa Asai-Ujike;浅井あづさ
• 通讯作者: 浅井あづさ

Large defects of type I allergic response in telomerase reverse trancriptase knockout mice.

端粒酶逆转录酶基因敲除小鼠I型过敏反应的大缺陷。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Leukocyte Biology. 82
• 作者: 上田 啓貴;三浦 英生;上田 啓貴;Nobuki Ueta;Nobuki Ueta;上田 啓貴;竹田 香織;竹田 香織;竹田 香織[邦訳](スザンナ・クレペリオ[著]);名畑太智;名畑太智;磯田 典和;磯田 典和;磯田 典和;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Azusa Asai-Ujike
• 通讯作者: Azusa Asai-Ujike

I型アレルギー反応におけるTERTの機能解析

TERT在I型过敏反应中的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 上田 啓貴;三浦 英生;上田 啓貴;Nobuki Ueta;Nobuki Ueta;上田 啓貴;竹田 香織;竹田 香織;竹田 香織[邦訳](スザンナ・クレペリオ[著]);名畑太智;名畑太智;磯田 典和;磯田 典和;磯田 典和;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Takashi Ishigami;石上 享嗣;Azusa Asai-Ujike;浅井あづさ;浅井 あづさ
• 通讯作者: 浅井 あづさ