膵ランゲルハンス島形成機構の解明 新たな膵島再生療法を目指して

阐明胰腺朗格汉斯胰岛形成机制 瞄准新的胰岛再生疗法

• 批准号: 07J55091
• 负责人: 原 朱美
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J55091/
• 关键词: アクチビンシグナル; 膵島; 形態形成; α細胞; β細胞; マントル・コア構造; トランスジェニックマウス; Cre-LoxPシステム

Cre-LoxPシステムにより、タモキシフェン(TM)投与後、全身で変異型II型アクチビン受容体(trActRIIa)を過剰発現する遺伝子組み換えマウス(Tg-trActRIIa)を作製し、アクチビンシグナルを時間特異的に阻害した時の膵島形成への影響を形態学的に解析することにより、膵島構造形成へのアクチビンシグナルの役割を明らかにすることを目的として研究を進めた。Tg-trActRIIa作製には、LoxPおよびトランスジーンとしてtrActRIIaをもつCAGtrActRIIaマウス、TM投与後全身でcre recombinaseが機能するCAGCre-ER^<TM>マウス(ジャクソン研究所より購入)の2種類を用いた。CAGtrActRIIaファウンダーマウスの作出:CAGtrActRIIaコンストラクトのうち、CAGプロモーター、LoxP配列、そしてtrActRIIaおよびHAタグを含む領域約4890bpをマウス受精卵にインジェクションした。そして23系統のファウンダーマウスを作出し、現在、F2世代からF5世代まで交配を進めている。Tg-trActRIIaの作製:TMによる組み換え効率を調べるため、F3世代まで進んだCAGtrActRIIaマウスとCAGCre-ER^<TM>マウスを交配し、確定妊娠13日目の母獣に数種類の濃度(0、1、2、3、6mg/40g)のTMを投与した。投与数日後、PCR法および免疫組織化学的手法を用いて、胎仔のTMの組み換え効率を調べた。その結果、TMは3mg/40g以上投与することにより、投与後2日目でHAタグの発現が認められたことから、Cre-LoxPシステムが機能することが確認できた。現在、TMの濃度における各組織でのHAタグの発現量を解析している。Tg-trActRIIaの解析:数系統のCAGtrActRIIaマウスとCAGCre-ER^<TM>マウスを用いて、胎仔の膵発生初期にあたる確定妊娠9日目でTMを投与し、出生直後での形態変化の解析を開始した。現在、各胎仔の水平断連続切片を作製し、三次元的に詳細な解析を進めており、近日中に結果が出るものと考えられる。

Cre - LoxP シ ス テ ム に よ り, タ モ キ シ フ ェ ン (TM), after he and systemic で - different type II ア ク チ ビ ン by let body (trActRIIa) を turning 発 now す る heritage 伝 subgroups み in え マ ウ ス を (Tg - trActRIIa) for し, ア ク チ ビ ン シ グ ナ ル を time specific に resistance against し た when の Cui island shape Into へ の effect を morphology に resolution す る こ と に よ り, Cui island structure formation へ の ア ク チ ビ ン シ グ ナ ル の "を cut Ming ら か に す る こ と を purpose と し を て research into め た. Tg - trActRIIa cropping に は, LoxP お よ び ト ラ ン ス ジ ー ン と し て trActRIIa を も つ CAGtrActRIIa マ ウ ス cast with the whole body, TM で cre Function of recombinase が す る CAGCre - ER ^ > < TM マ ウ ス (ジ ャ ク ソ ン institute よ り buy) の を 2 species use い た. CAGtrActRIIa フ ァ ウ ン ダ ー マ ウ ス の made: CAGtrActRIIa コ ン ス ト ラ ク ト の う ち, the CAG プ ロ モ ー タ ー, LoxP match column, そ し て trActRIIa お よ び HA タ グ を containing about 4890 bp を む field マ ウ ス fertilized egg に イ ン ジ ェ ク シ ョ ン し た. 23 system そ し て の フ ァ ウ ン ダ ー マ ウ ス を し, now, F2 generation か ら F5 generation ま で mating を into め て い る. Tg - trActRIIa の cropping: TM に よ み る group in え sharper rate を adjustable べ る た め, F3 generation ま で into ん だ CAGtrActRIIa マ ウ ス と CAGCre - ER ^ > < TM マ ウ ス を mating し 13 orders, determine the pregnancy の mother 獣 に の number concentration (0, 1, 2, 3, 6, 40 mg/g) を の TM Throw it to た た. After several days of administration, the PCR method および immunohistochemical technique を was used to exchange <s:1> て and the fetal <s:1> TM group み for え efficacy を adjustment べた. そ の results, 3 mg/TM は cast with over 40 g す る こ と に よ り, cast with the 2 item で HA タ グ の 発 が now recognize め ら れ た こ と か ら, Cre - LoxP シ ス テ ム が function す る こ と が confirm で き た. Now, TM <s:1> concentration における each tissue で <s:1> HAタグ <s:1> occurrence amount を analysis る て る る る. Tg - trActRIIa の analytic: number system の CAGtrActRIIa マ ウ ス と CAGCre - ER ^ > < TM マ ウ ス を with い て, tire seed の Cui 発 born early に あ た る determine pregnancy 9 を cast with し で TM, straight after birth で の morphology variations の parsing を began し た. Now, each child boy disconnected 続 slicing の を し, three yuan に detail analytical を な into め て お り, recently に results が out る も の と exam え ら れ る.

项目成果

Rat pancreatic islet is formed by unification of multiple endocrine cell clusters

• DOI: 10.1002/dvdy.21359
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: DEVELOPMENTAL DYNAMICS
• 影响因子: 2.5
• 作者: Hara, Akemi;Kadoya, Yuichi;Yamashina, Shohei
• 通讯作者: Yamashina, Shohei

Dicer is required for maintaining adult pancreas.

维护成年胰腺需要迪切尔。

• DOI: 10.1371/journal.pone.0004212
• 发表时间: 2009
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Morita S;Hara A;Kojima I;Horii T;Kimura M;Kitamura T;Ochiya T;Nakanishi K;Matoba R;Matsubara K;Hatada I
• 通讯作者: Hatada I

Sweet taste receptor expressed in pancreatic β cells activates the calcium and cyclic AMP signaling systems and stimulates insulin secretion

胰腺β细胞中表达的甜味受体激活钙和环AMP信号系统并刺激胰岛素分泌

• 发表时间: 2009
• 期刊: PLoS ONE 4(4)
• 作者: Nakagawa Y;Nagasawa M;Yamada S;Hara A;et al.
• 通讯作者: et al.

アクチビンシグナルによる膵島マントル・コア構造形成機構の解明

通过激活素信号阐明胰岛套和核心结构形成的机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Hara;A.;Kadoya;Y.;Kojima;I.;Yamashina;S.;原朱美
• 通讯作者: 原朱美

Reversal of streptozotocin-induced hyperglycemia by continuous supply of betacellulin in mice

• DOI: 10.1080/08977190802136854
• 发表时间: 2008-01
• 期刊: Growth Factors
• 影响因子: 1.8
• 作者: Yoritsuna Yamamoto;S. Yamada;T. Kodera;Akemi Hara;K. Motoyoshi;Yuji Tanaka;Tadahiro Nagaoka;M. Seno;I. Kojima