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Elucidation of self-organization process in living organism by small number of molecules using functional imaging

使用功能成像阐明生物体中少量分子的自组织过程

基本信息

批准号：
18687014
负责人：
NAGAI Takeharu
金额：
$ 19.47万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18687014/
关键词：
シグナル伝達イメージング顕微鏡 FRET 自己組織化タンパク質 1分子可視化

项目摘要

本研究は細胞性粘菌のcAMPに対する走化性の分子過程を可視化することで、細胞がゆらぎと同じレベルの濃度勾配の中で、その勾配の方向を的確に認識し、運動する方向を決定する仕組みを解明することを目的とした。その為に、タンパク質性Ca2+センサーであるカメレオンYC3.60のCa2+センシングドメインにアミノ酸変異を導入することで、これまで報告された如何なるCa2+センサーよりもCa2+に対して高い親和性(Kd=20nM)を持つ、つまり超高感度なCa2+センサーcameleon ZEROを開発した。驚いたことにこのセンサーを発現させた細胞性粘菌は野生型同様に分裂増殖することから内在のCa2+キレート効果による細胞毒性は無いと考えられた。この細胞株を用いて集合体形成時におけるカルシウム動態の観察を行ったところ、BZ(ベルーゾフ・ジャボチンスキー)反応様のスパイラルおよびターゲットパターンのみならず、時空間的にランダムに発火するカルシウム動態を観察することに成功した。

This study is based on the visualization of the molecular process of cellular slime mold, cAMP, and the molecular process of cellular slime mold, and the concentration of cellular slime mold. The degree of coordination, the direction of coordination, the direction of movement, the direction of movement, the determination of movement, the interpretation of purpose, and the purpose of movement.その为に、タンパク性Ca2+センサーであるカメレオンYC3.60のCa2+センシングドメインにアミノ acid 変isoを Import することで、これまでreport How to use されたなるCa2+センサーよりもCa2+に対してHigh affinity (Kd=20nM)をholdつ、つまりSuper high sensitivity なCa2+センサーcameleon ZEROを开発した. The secretion of cellular slime mold is the same as wild-type cleavage and multiplication. The inner Ca2 + キレート effect of the ることから is the cytotoxicity of the ることから. Observation on the dynamics of the cell line and the formation of the cell aggregate using いてBZ The time and space of the time and spaceランダムに発火するカルシウムdynamic を観看することに成した.