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アルツハイマー病分子病態の解明:カイコモデル系によるアプローチ

阐明阿尔茨海默病的分子病理学：利用蚕模型系统的方法

基本信息

批准号：
18890212
负责人：
天竺桂弘子
金额：
$ 1.68万
依托单位：
Meiji Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は,アルツハイマー病関連遺伝子カイコオルソログ,14-3-3epsion(14E),zeta(14Z)について機能解析を行った。はじめに,絹糸腺を二次元電気泳動で分離し,Xpress-tagged14-3-3plobeと反応するスポットについて解析したところ,カイコHeat Shock Protein 60(BmHSP60)であることが明らかとなった。HEK293細胞に14Eまたは,14ZとBmHSP60を共発現させ,免疫沈降法により,両者の結合を確認することができた。さらに,BmHSP60と14Eの結合部位を探索するために,BmHSP60のN末端部位(2-261)およびC末端部位(262-572)の組み換えタンパク質を作製し,同様の方法で両者の結合を検討した。その結果14Eは,BmHSP60のN末端部分とリン酸化非依存的に結合することが明らかとなった。次に,カイコ発生ステージおよび5齢幼虫期間の主要な組織における,14E,14Z,BmHSP60の発現をウエスタンブロティングで検討した。14E,14Z,BmHSP60ともに全発生ステージの主要な組織で高発現していることが明らかとなった。14-3-3は細胞シグナル伝達を担う分子アダプターである。一方Hsp60はタンパク質フォールディングを制御する分子シャペロンである。両者の結合は,カイコ細胞におけるタンパク質成熟と機能発現の連携に重要な役割を果たしていると思われた。この研究成果は,Neuroscience Researchに投稿した(印刷中)。

This year's disease-related legacy はカイコオルソログ, 14-3-3epsion(14E), zeta(14Z) についてfunctional analysisを行った.はじめに,绢糸 glandをtwo-dimensional electrophoresisでseparationし,Xpress-tagged14-3-3plobeとreflectionするスポットについてanalyticsしたところ,カイコHeat Shock Protein 60(BmHSP60)であることが明らかとなった. HEK293 cells were tested for 14E, 14Z and BmHSP60 were tested for co-expression, immunoprecipitation was tested, and binding was confirmed for 14Z and BmHSP60.さらに, BmHSP60と14E's binding site をExploration するために, BmHSP60's N-terminal site (2-261) The C-terminal part (262-572) of the および group is changed to the えタンパクquality を production system, and the same method is used to combine the を検した.その14Eは, BmHSP60's N-terminal part とリン acidification-independent に-binding することが明らかとなった. Second time, the main organization of the larval stage of the 5-year-old larvae, 14 E,14Z,BmHSP60の発成をウエスタンブロティングで検した. 14E,14Z,BmHSP60ともに全発生ステージの Main organization で高発行见していることが明らかとなった. 14-3-3はcellシグナル伝达を偆moleculeアダプターである. One side Hsp60 はタンパク性フォールディングをcontrol molecule するシャペロンである. The combination of the two is the key to the physical maturity and functional development of the cells.このResearch resultsは, Neuroscience ResearchにContributionした(in press).