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自己と非自己の認識を撹乱させる寄生蜂による宿主への侵入の仕組みの解明

阐明寄生蜂入侵宿主破坏自我和非自我识别的机制

基本信息

批准号：
20K20571
负责人：
天竺桂弘子
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、cDNAクローニングし配列決定した組織親和的侵入に関わる因子の特性解析および、RNA干渉の手法の構築を試みた。最初に、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子のmRNA発現の挙動を調べたところ、桑実胚の時期のみ、その発現が上昇し、多胚になると、その発現が低下することが明らかになった。また、幼若ホルモンJHをキンウワバトビコバチ胚子培養系に添加し、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子のmRNA発現の挙動を調べたところ、その発現が低下した。このことから、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子は、宿主の発育段階において、JHの影響を受けることが強く示唆された。次に、RNA干渉の手法の構築を試みた。桑実胚培養系にdsRNAを添加し、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子の転写産物の発現量を定量RT-PCRを用いて検討した。その結果、転写産物の発現量が低下し、RNA干渉が成功したと考えられた。現在、さらに発現を低下させる手法を検討している。また、組織親和的侵入に関わる因子の部分配列を用いて作製した抗血清と、組換えタンパク質または、キンウワバトビコバチ胚子を用いて交差性を検討したところ、交差性が確認できなかった。そのため、部分配列の位置を変更し、抗体を作り直し、交差性を確認する予定である。昨年度に引き続き、キンウワバトビコバチ胚子による寄主胚子侵入を検討するアッセイ系の構築を試みた。しかし、健康な宿主個体およびキンウワバトビコバチを確保できなかったこと、機器故障等のトラブルに見舞われ、十分に検討ができなかった。

This year, we will try to analyze the characteristics of the factors related to the invasion of tissue affinity and the construction of RNA stem cells. At the beginning, the expression of mRNA of factors related to the invasion of tissue affinity was modulated, the expression of mulberry embryo was increased, the expression of polyembryo was decreased, and the expression of protein was decreased. The expression of mRNA in embryo culture system was decreased by addition of protein. The invasion of tissue affinity is related to factors such as host development stage and JH. The construction of RNA stem cells was studied. Quantitative RT-PCR was used to detect the expression of genes related to the invasion of tissue affinity in mulberry embryo culture systems. The results showed that the production of RNA was low, and RNA was successfully produced. Now, today's show is low, and today's show is low. The partial alignment of the invasion factors related to tissue affinity was determined by the use of antiserum, composition, and cross-reactivity. The position of the partial alignment is changed, the antibody is made straight, and the cross property is confirmed. Last year, the host embryo invasion was investigated and the construction of the host embryo system was tested. The host is healthy and the host is healthy. The host is healthy and the host is healthy.