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自己と非自己の認識を撹乱させる寄生蜂による宿主への侵入の仕組みの解明

阐明寄生蜂入侵宿主破坏自我和非自我识别的机制

基本信息

批准号：
20K20571
负责人：
天竺桂弘子
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、cDNAクローニングし配列決定した組織親和的侵入に関わる因子の特性解析および、RNA干渉の手法の構築を試みた。最初に、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子のmRNA発現の挙動を調べたところ、桑実胚の時期のみ、その発現が上昇し、多胚になると、その発現が低下することが明らかになった。また、幼若ホルモンJHをキンウワバトビコバチ胚子培養系に添加し、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子のmRNA発現の挙動を調べたところ、その発現が低下した。このことから、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子は、宿主の発育段階において、JHの影響を受けることが強く示唆された。次に、RNA干渉の手法の構築を試みた。桑実胚培養系にdsRNAを添加し、キンウワバトビコバチの組織親和的侵入に関わる因子の転写産物の発現量を定量RT-PCRを用いて検討した。その結果、転写産物の発現量が低下し、RNA干渉が成功したと考えられた。現在、さらに発現を低下させる手法を検討している。また、組織親和的侵入に関わる因子の部分配列を用いて作製した抗血清と、組換えタンパク質または、キンウワバトビコバチ胚子を用いて交差性を検討したところ、交差性が確認できなかった。そのため、部分配列の位置を変更し、抗体を作り直し、交差性を確認する予定である。昨年度に引き続き、キンウワバトビコバチ胚子による寄主胚子侵入を検討するアッセイ系の構築を試みた。しかし、健康な宿主個体およびキンウワバトビコバチを確保できなかったこと、機器故障等のトラブルに見舞われ、十分に検討ができなかった。

For the current year, cDNA and RNA systems have been assigned to determine the organization and invasion of the organization and the characteristics of the intrusion factor, and the performance test. In the first place, the tissue and the intrusive factors of the mRNA were detected. The temperature of the mulberry embryos, the temperature of the mulberry embryos, the temperature of the embryos, and the temperature were detected. In the first place, if you are young, you will be affected by the addition of JH, the tissue and the invasion factor (mRNA). The intrusive factors of the tissue and the host, the host, the JH, the host, and the host. The second time, the RNA method was used to test the situation. Mulberry embryo culture is based on the addition of dsRNA, the addition of tissue and the invasion of tissue and invasion of mulberry embryo culture. The quantitative RT-PCR of mulberry embryo culture was measured by quantitative PCR. The result of the test, the result of the writing, the low quantity of the product, and the success of the RNA. At present, there is a low level of gimmick. Some of the factors of invasion, tissue and invasion are assigned to use the antiserum, the tissue and the embryo to use the antiserum, the tissue and the tissue to make sure that the antiserum is used as the antiserum, the tissue is used as the antiserum. It is necessary to confirm the position of the antibody, the position, the position, the position, Last year, we were told that the host embryo had invaded the host embryo and that the host embryo had invaded the host embryo. Please make sure that you do not have any trouble, such as the failure of the machine, the failure of the machine, etc., and so on.