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Mechanism regulating proliferation and differentiation of liver stem cells

肝干细胞增殖分化的调控机制

基本信息

批准号：
19790472
负责人：
KAMIYA Akihide
金额：
$ 2.27万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19790472/
关键词：
肝幹細胞肝再生肝臓病学

项目摘要

我々は、より効率的なマウス胎仔肝幹細胞の分離を目指したスクリーニングを行い、E13-14 の肝幹・前駆細胞にCD13 やCD133 が強く発現することを見出した。これらの抗原抗体を用いたclone sorting による培養を行なうと、single cell 由来の大型でアルブミン(肝細胞マーカー)・cytokeratin 19(CK19, 胆管細胞マーカー)両陽性のコロニーが形成できた。つまり、CD13 やCD133 陽性細胞が高い増殖能と二方向の分化能を持つ細胞であることがin vitro で示された。また、CD13 陽性細胞を、薬剤および肝切除により肝再生を誘導したマウスに移植することで、生体内で生着・増殖することを示した。Sall4はES細胞で未分化性維持や分化決定に重要な役割を果たしている転写因子である。Sall4はマウス肝臓由来Dlk+CD45-Ter119-分画のhepatoblast に発現し、成体の肝細胞では発現を認めず、肝発生進行に伴い発現は減少した。Hepatoblast にSall4を強制発現し肝細胞分化を誘導するオンコスタチンMや細胞外マトリクス存在下で培養したところ、肝細胞分化が抑制された。逆に胆管分化を誘導するコラーゲンゲル包埋培養では、CK19+のbranching構造の数と大きさが増加した。一方Sall4をノックダウンするとbranching構造形成が抑制された。胆管障害マウスへSall4強制発現hepatoblastを移植すると胆管へ高率に分化することからSall4はhepatoblastの肝細胞分化を抑制する一方で胆管細胞分化を促進し、hepatoblastの2方向分化決定に重要な役割を担う可能性が示唆された。

We found that the expression of CD13 and CD133 in E13-14 cells was significantly higher than that in normal cells. Antigen and antibody are used in clone sorting. Single cell is derived from large cells. Cytokeratin 19(CK19, bile duct cells) is positive. CD13 and CD133 positive cells have high proliferation ability and two-way differentiation ability. CD13-positive cells were induced by hepatectomy and transplanted into the liver. Sall4 is an important factor in ES cell differentiation and maintenance. Sall4 is the origin of Dlk+ CD45-Ter119-labeled hepatocyte, adult hepatocyte, and liver development. Hepatocyte differentiation was induced by Sall4 stress and inhibited by extracellular culture. The number of CK19 + and branching-like structures in the culture medium increased significantly in the induction of reverse bile duct differentiation. One side of the Sall4 is a branching structure. Bile duct injury Sall4 stress produces high rate of hepatoblast transplantation and differentiation, and Sall4 inhibits hepatoblast differentiation. One side promotes cholangiocyte differentiation and the other side determines the importance of hepatoblast differentiation.