ＰＥＮＤＲＥＤ症候群患者由来のｉＰＳ樹立とそのＰＥＮＤＲＩＮ機能解析

（１）PENDRED症候群特異的iPS細胞の樹立：PENDRED症候群患者３症例から採血を行い疾患特異的iPS細胞を樹立した（２）内耳PENDRIN陽性細胞の誘導法の確立：これまでに内耳PENDRIN陽性細胞の誘導方法は知られていなかった。今回、新規誘導法を樹立し、iPS細胞から内耳前駆細胞マーカー陽性細胞を経て内耳細胞特異的マーカーおよびPENDRED症候群の原因遺伝子であるPENDRINの発現を示す内耳PENDRIN陽性細胞の誘導法を確立した。誘導法の効率化も行いほぼ100％の細胞でPENDRINを発現する高効率誘導法の確立にも成功した。(３）疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞と、正常コントロールラインから誘導した内耳PENDRIN陽性細胞の細胞生物学的特性の比較：疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞と正常コントロールラインから誘導した内耳PENDRIN陽性細胞の細胞生物学的特性の比較を行い、ストレス脆弱性を疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞では示すことを発見した。（４）疾患iPS細胞におけるゲノム編集技術を用いた遺伝子変異修復：疾患iPS細胞に対してTALENを用いてゲノム編集（遺伝子修復）を行い、H723R homo　変異ラインにおいて、１アリルのみ正常化したラインおよび２アリルとも正常化されたラインの樹立に成功した。前述の疾患細胞由来の内耳細胞にのみみられるストレス脆弱性は遺伝子修復により軽減されることを確認した。（５）疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞におけるストレス脆弱性をターゲットとした薬剤スクリーニング系の構築とそれを利用した既存薬スクリーニングの実施:疾患細胞由来の内耳細胞にのみみられるストレス脆弱性を評価対象とし、既存薬スクリーニングを行いストレス脆弱性を軽減する薬剤の同定に成功。

（１）PENDRED症候群特異的iPS細胞の樹立：PENDRED症候群患者３症例から採血を行い疾患特異的iPS細胞を樹立した（２）内耳PENDRIN陽性細胞の誘導法の確立：これまでに内耳PENDRIN陽性細胞の誘導方法は知られていなかった。今回、新規誘導法を樹立し、iPS細胞から内耳前駆細胞マーカー陽性細胞を経て内耳細胞特異的マーカーおよびPENDRED症候群の原因遺伝子であるPENDRINの発現を示す内耳PENDRIN陽性細胞の誘導法を確立した。誘導法の効率化も行いほぼ100％の細胞でPENDRINを発現する高効率誘導法の確立にも成功した。(３）疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞と、正常コントロールラインから誘導した内耳PENDRIN陽性細胞の細胞生物学的特性の比較：疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞と正常コントロールラインから誘導した内耳PENDRIN陽性細胞の細胞生物学的特性の比較を行い、ストレス脆弱性を疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞では示すことを発見した。（４）疾患iPS細胞におけるゲノム編集技術を用いた遺伝子変異修復：疾患iPS細胞に対してTALENを用いてゲノム編集（遺伝子修復）を行い、H723R homo　変異ラインにおいて、１アリルのみ正常化したラインおよび２アリルとも正常化されたラインの樹立に成功した。前述の疾患細胞由来の内耳細胞にのみみられるストレス脆弱性は遺伝子修復により軽減されることを確認した。（５）疾患iPS細胞から誘導した内耳PENDRIN陽性細胞におけるストレス脆弱性をターゲットとした薬剤スクリーニング系の構築とそれを利用した既存薬スクリーニングの実施:疾患細胞由来の内耳細胞にのみみられるストレス脆弱性を評価対象とし、既存薬スクリーニングを行いストレス脆弱性を軽減する薬剤の同定に成功。