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スチルベン誘導体の二量化反応を利用した高効率な二重鎖光架橋法の開発

利用二苯乙烯衍生物二聚反应开发高效双链光交联方法

基本信息

批准号：
15J08696
负责人：
土居哲也
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J08696/
关键词：
DNA 光架橋スチルベンスチリルピレン [2+2]光環化付加

项目摘要

本研究では、スチリルピレンの [2+2]光環化付加反応を利用した可視光照射によるDNA二重鎖架橋法の開発を行った。DNAやRNA二重鎖を鎖間で架橋する手法は、生体系の解析などにおいて盛んに利用される。その中において、これまでに我々はスチルベン誘導体の[2+2]環化付加反応を利用した核酸二重鎖架橋法を報告している。しかしながら、上記の方法を含め、これまでに用いられている核酸二重鎖の光架橋法はすべて400 nm以下の紫外光照射を必要としており、生細胞中で用いた場合に細胞障害を生じるなど、その応用の幅は限られていた。そこで本研究では、これまでの紫外光に代えて、可視光をトリガーとした核酸二重鎖架橋法の開発を目指した。本研究では新たな光架橋剤としてスチリルピレンを用いた。スチリルピレンは、従来のスチルベンよりも拡張されたπ共役系を有しており、可視光による [2+2]光環化付加反応の進行が期待される。まず、架橋反応について検討するため、スチリルピレンを一対導入したDNA二重鎖に対して455 nmの可視光照射を行った。結果、光照射に伴って、[2+2]光環化付加に特徴的な吸収バンドの短波長シフト、および発光強度の減少が見られ、架橋反応の進行が確認された。さらに、架橋された二重鎖に対し340 nmの紫外光照射を行ったところ、逆反応が進行し、反応前の非架橋状態へと選択的に回復することが明らかになった。以上のように、スチリルピレンの[2+2]光環化付加反応を利用することで、可視光トリガーによる可逆的な核酸二重鎖架橋法の開発に成功した。今後、この架橋法を利用することで、生細胞中における架橋構造の形成・解離の制御および、それに伴う細胞機能の光制御といった応用が可能であると考えられる。

In this study, we are concerned with the application of photoluminescence plus anti-radiation in this study. the double frame method of photoluminescence DNA is used in this study. DNA and RNA double-duty systems are used to analyze the techniques and methods of health system analysis. In the middle of the experiment, we will use the method of double scaffolding of nucleic acid to report the information on the environment [2]. It is necessary to use ultraviolet light below 400 nm to irradiate the necessary UV light, the cell barrier is used to damage the cell barrier, the amplitude is limited to the cell size. In this study, UV light was used to detect nucleic acid double scaffolding. In this study, the new light frame is used in this study. In order to improve the performance of the co-operation system, it is necessary to improve the performance of the system, which can be used in the light environment. You can use the light to illuminate the line of light when you enter the DNA double filter. 455 nm. Results: the results show that the light irradiation is accompanied by light irradiation, the absorption wavelength of the [2] light environment, the short wave length of the absorption spectrum, the light intensity of the light intensity, and the response are confirmed. The ultraviolet light of 340 nm is used to illuminate the system, reverse the process, and reverse the selection of the non-rack status in the front. The above results show that the photoluminescence plus counteraction is successful by using the method of double scaffolding of nucleic acid, which is reversible. In the future, the scaffolding method is used to make use of the scaffolding system to form a dissociation system, which can be used to control the system, and the machine can be used to control the system.