乾乳期のウシ乳腺組織における再構築メカニズムの解明

阐明干奶期牛乳腺组织的重塑机制

• 批准号: 15K07713
• 负责人: 中島 恵一
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15K07713/
• 关键词: 乳腺; 乳腺上皮細胞; 乾乳期

ウシ乳腺は乾乳期に退行し、再構築されると考えられているが、そのメカニズムについては未だに不明な部分が多い。本研究では、ウシ乳腺組織で乾乳期特異的に発現する遺伝子を探索・同定するとともに、ウシ乳腺組織を構成する細胞の相互作用を明らかにすることを目的とした。本年度は以下の成果が得られた。１）申請者らはこれまでに、乾乳期のウシ乳腺においてBMPタンパク質、BMP受容体の発現が増加することを明らかにした。本研究において乳腺の退行に伴ってラクトフェリンの分泌量が増加することを見出した。そこで、ラクトフェリンがBMPのmRNA発現に及ぼす影響を調べた結果、ラクトフェリン処理により乳腺上皮細胞におけるBMP2およびBMP4のmRNA発現が増加した。さらに、BMP4が乳腺上皮細胞におけるbeta-caseinの発現を抑制したことから、BMPが乾乳期におけるウシ乳腺の退行・再構築に関与することが示唆された。２）マイクロアレイ法により泌乳中期と乾乳期の乳腺組織で発現する遺伝子を比較し、発現が変動する因子を抽出した。その中から細胞外に分泌される因子に着目し、リアルタイムPCR法によってそれらの発現変動を確認した結果、乾乳期におけるCXCL13およびCXCL9の発現は泌乳中期の約4倍であった。一方、乳タンパク質であるalpha-lactalbuminの発現は、乳合成活性に伴って増加し、泌乳中期に乾乳期の約30倍に達した。３）乳腺上皮細胞、乳腺線維芽細胞をコラーゲンゲル中で共培養し、細胞塊の形成を観察したところ、乳腺上皮細胞単独での培養と比較して両細胞の共培養では、細胞塊が大きくなり、長時間持続することが観察された。４）血液中に漏出するalpha-lactalbuminが、ウシ乳腺の退行・再構築を推定するマーカーの候補となることを示した。

ウ シ breast は dry milk period に regression し and constructing さ れ る と exam え ら れ て い る が, そ の メ カ ニ ズ ム に つ い て は not だ に が い more unknown な part. This study で は, ウ シ breast tissue で dry milk stage specific に 発 now す る posthumous son 伝 を exploration, with fixed す る と と も に, ウ シ mammary gland tissue を す る cells の interaction を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. For the current year, the following が achievements が obtained られた. 1) applicants ら は こ れ ま で に, dried milk period の ウ シ breast に お い て BMP タ ン パ ク qualitative, BMP, let body の 発 now が raised す る こ と を Ming ら か に し た. This study に お い て breast の regression に with っ て ラ ク ト フ ェ リ ン の secretion が raised plus す る こ と を shows し た. そ こ で, ラ ク ト フ ェ リ ン が BMP の mRNA 発 に and now ぼ す influence を adjustable べ た results, ラ ク ト フ ェ リ ン 処 Richard に よ り mammary gland epithelial cells に お け る BMP2 お よ び BMP4 の mRNA 発 now が raised し た. さ ら に, BMP4 が mammary gland epithelial cells に お け る beta - casein の 発 now を inhibit し た こ と か ら, BMP が dry milk period に お け る ウ シ breast の regression, then construct に masato and す る こ と が in stopping さ れ た. 2) マ イ ク ロ ア レ イ method に よ り middle lactation と dry の breast feeding breast tissue で 発 now す る heritage 伝 を comparing し, 発 が now - move す る factor を spare し た. In そ の か ら secretion of extracellular に さ れ る factor に mesh し, リ ア ル タ イ ム PCR method に よ っ て そ れ ら の 発 now - move を confirm し た results, dry milk period に お け る CXCL13 お よ び CXCL9 の 発 now は middle lactation の is about 4 times で あ っ た. One side, the milk タ パ パ パ of the amyloid であるalpha-lactalbumin た is present, the milk synthesis activity に is accompanied by a って increase <s:1>, and the mid-lactation に dry lactation <s:1> is about 30 times に up to た. 3) mammary epithelial cells, breast line d bud を コ ラ ー ゲ ン ゲ ル で trained in し, cell block の form を 観 examine し た と こ ろ, mammary gland epithelial cells 単 alone で の cultivate と compare し て の struck cells co-culture で は, large cell block が き く な り, long 続 す る こ と が 観 examine さ れ た. 4) in the blood に leakage す る alpha - lactalbumin が, ウ シ breast の regression, then construct presumption を す る マ ー カ ー の alternate と な る こ と を shown し た.

项目成果

ラクトフェリンがウシ乳腺線維芽細胞の増殖及び細胞増殖因子の発現に及ぼす影響

乳铁蛋白对牛乳腺成纤维细胞增殖及细胞生长因子表达的影响

• 发表时间: 2016
• 期刊: 日本乳房炎研究会proceedings
• 作者: 中島恵一;中村正斗;河村あさみ;伊藤文彰;山崎武志
• 通讯作者: 山崎武志