離乳期の小腸上皮成熟の分子機構の解明

阐明断奶期间小肠上皮成熟的分子机制

• 批准号: 16K08519
• 负责人: 佐藤 隆史
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K08519/
• 关键词: 小腸上皮細胞; 小腸上皮; マウス遺伝学; 栄養吸収; 遺伝子発現; 細胞形態

哺乳動物では、離乳期において小腸の上皮細胞の機能が大きく変化する。この過程では、より効率的な栄養摂取に必須な因子の発現や細胞内局在に明瞭な変化が生じるが、そのメカニズムは不明な点が多い。そこで本研究では、小腸上皮の機能成熟課程において様々な分子の発現や局在を不可逆的に制御する分子の同定と機能の解明を目指した。本研究は以下のように進行した。①マイクロアレイを用いて離乳後に発現の増加する遺伝子を検索したところ、大きく分けて3種の役割を持つ遺伝子が最も顕著な増加を示した。小腸の成熟課程における遺伝子発現変動は顕著であり、生後約2週を境として様々な遺伝子の発現変動が確認できた。発現変動が観られた遺伝子は3種の生理機能に関わるものに大別され、いずれも栄養吸収、代謝と密接に関連していることから、これら一群の分子の発現誘導が小腸の機能成熟に重要な役割を果たしている可能性が高いと考えている。②マウス空腸のから上皮細胞を分離し、器官培養または細胞培養する手法を他大学との共同研究により確立出来る可能性があり、in vitro系での解析系の樹立も視野に入れている。最近まで大阪大学との共同研究により、細胞の極性形成のメカニズム解析の研究を継続しており、その成果の一部が論文に報告された（Kunii et al., JCB 2016）。今後、本計画に当該研究者の協力が得られれば上皮細胞において様々な解析が可能となり、成熟に伴う細胞の形態の制御における分子メカニズムを明らかに出来ると考えている。③これまでにCRSPR-CAS9を使った遺伝子ノックインマウスの作製を確立し、特定の細胞種の系譜追跡等に用いることが出来る有用なマウスの作出が完了している。本課題には細胞の系譜追跡が必要となることも考えられ、本手法を応用することで研究をより進展させることが出来ると考えている。

In mammals, で にお, にお て, て, the functions of small intestinal <s:1> epithelial cells <e:1> undergo が major く く changes する. こ の process で は, よ り sharper rate な tech students.their ownship raise, must take に な factor の 発 now や cells inside bureau in に clear な variations change が raw じ る が, そ の メ カ ニ ズ ム は unknown な が い more. そ こ で this study で は, small intestinal epithelial の functional mature course に お い て others 々 な molecular の 発 now や bureau in を irreversible に suppression す の る molecules with fixed と function の interpret を refers し た. This study ように conducts た た below ように. 1) マ イ ク ロ ア レ イ を with い て from milk after に 発 now の raised す る heritage 伝 son を 検 cable し た と こ ろ, big き く points け て three の "を hold つ cut but 伝 son が the も 顕 with な raised を shown し た. Small intestine の mature course に お け る heritage 伝 発 now - move は 顕 the で あ り, raw を condition about 2 weeks after と し て others 々 な heritage 伝 son の 発 now - move が confirm で き た. 発 now - move が 観 ら れ た posthumous son 伝 は three の physiology に masato わ る も の に comparing さ れ, い ず れ も tech students.their ownship 収 absorption, metabolism と contact に masato even し て い る こ と か ら, こ れ ら a group of molecular の の 発 now induced が function of small intestine の important な "を cut fruit mature に た し て い likely が る い と exam え て い る. (2) マ ウ ス jejunum の か ら epithelial cell separation し, organ culture を ま た は cell culture す る gimmick を he university と の joint research に よ り set out possibility る が あ り, in vitro で の parsing is の vision set up も に into れ て い る. Osaka university recently ま で と の joint research に よ り, cell polarity の form の メ カ ニ ズ ム analytic の を 継 続 し て お り, そ result の a が の に report さ れ た (Kunii et al., JCB, 2016). In the future, this plan に when the researchers の together が ら れ れ ば epithelial cells に お い て others 々 な resolution が may と な り cells and mature に う の form の suppression に お け る molecular メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に out る と exam え て い る. (3) こ れ ま で に CRSPR - CAS9 を make っ た posthumous son 伝 ノ ッ ク イ ン マ ウ ス を establish the の cropping し tracing, etc, specific の cells の genealogy に with い る こ と が out useful る な マ ウ ス の make finished が し て い る. This topic に は cells の pedigree tracing が necessary と な る こ と も exam え ら れ, this technique を 応 with す る こ と で research を よ り progress さ せ る こ と が out る と exam え て い る.

项目成果

群馬大学生体調節研究所

群马大学生物调节研究所