遺伝性乳がん原因遺伝子産物ＢＲＣＡ２のリサイクリングエンドソームにおける機能解析

遗传性乳腺癌致病基因产物BRCA2在回收内体中的功能分析

基本信息

批准号：
16K08639
负责人：
高岡美帆
金额：
$ 3.08万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-01 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度、エンドソームにおけるBRCA2のパートナーとしてマススペクトル解析により候補となったRab11-FIP3をターゲットとして検証を行ったが、両者の相互作用の確定には至らなかった。そこで今年度は、リサイクリングエンドソームにおけるBRCA2の直接的なパートナーを探索するという方針を転換し、①BRCA遺伝子変異が多くみられるトリプルネガティブ乳がんとリサイクリングエンドソームとの関連についての検証、②細胞内小胞の融合や分断にBRCA2が関与する可能性に視野を広げたターゲット探索を行った。まず①について、研究者分担者によるトリプルネガティブ乳がん発現データ解析から、LRP8 というLDLレセプターがトリプルネガティブ乳がん特異的に高発現していることがわかった。LRP8は細胞膜上に存在してエンドサイトーシスされリサイクルされることが知られている。がんの増殖能に対するLRP8の影響について、LRP8発現抑制したトリプルネガティブ乳がん細胞株MDA-MB-231およびBT-549を用いて検証した。その結果、がん増殖に対してLRP8は亢進に働いているものと考えられた。乳がんの転移先として知られる脳組織にはLRP8のリガンド Reelin が豊富に存在しており、LRP8のリサイクルが転移先の組織において活性化することで、がん増殖が促進される可能性が考えられる。また②については、BRCA１、2がミトコンドリアのオートファジー（マイトファジー）に関与するという報告が前年度発表されたことに基づき、ミトコンドリア損傷の有無によるBRCA2結合因子を比較検討した。その結果、過剰発現の系ではあるが、BRCA２-FLAGとミトコンドリア融合に関わる分子との相互作用を示すデータを得ることができた（未発表）。これら結果が、今後、遺伝性乳がん発症および悪性化のメカニズム解明につながることを期待したい。

在上一年，我们测试了Rab11-Fip3，该rab11-fip3是通过质谱分析作为目标的候选者作为BRCA2的伙伴，但尚未确认两者之间的相互作用。因此，今年，我们改变了在回收内体中寻找BRCA2直接合作伙伴的政策，并进行了目标搜索，以扩大我们的观点，以使BRCA2可能参与细胞内囊泡的融合和分裂的可能性。首先，关于1个，我们发现，基于研究人员对三阴性乳腺癌表达数据的分析，称为LRP8的LDL受体在三阴性乳腺癌中特别表达。已知LRP8存在于细胞膜上并进行内吞和回收。 LRP8对抑制LRP8表达的三重阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和BT-549验证了LRP8对癌症增殖能力的影响。结果，人们认为LRP8是针对癌症生长的增强活性。在LRP8配体reelin中，脑组织被称为乳腺癌转移的地方很丰富，当在靶组织中激活LRP8回收利用时，可能会促进癌症增殖。关于②，根据上一年的报告，即BRCA1和2参与线粒体自噬（Mitephagy），我们根据是否存在线粒体损害进行了比较并检查了BRCA2结合因子。结果，尽管它是一个过表达的系统，但获得了数据，显示了与线粒体融合有关的BRCA2-FLAG与分子之间的相互作用（未发表）。我们希望这些结果将导致阐明未来遗传性乳腺癌发展和恶性转化的机制。