マウス肺移植モデルによる慢性拒絶反応の早期診断及び治療法の開発

利用小鼠肺移植模型开发慢性排斥反应的早期诊断和治疗

• 批准号: 16K10672
• 负责人: 藤原 大樹
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K10672/
• 关键词: 肺移植後慢性拒絶反応; 閉塞性気管支炎; マウス同所性肺移植; 縦隔リンパ節生検; 遺伝子発現網羅的解析; マイクロアレイ; 慢性拒絶反応; 閉塞性細気管支炎; 肺移植後慢性拒絶; リンパ節; 肺移植

慢性移植肺機能不全(CLAD)において、生体肺移植では特に診断のための組織検体採取が困難であり、経気管支肺生検の診断率も低いため、高精度かつ低侵襲である診断法が待たれる。我々はこれまでにマイナー組織適合抗原ミスマッチであるマウスC57BL/10をドナー肺として、マウスC57BL/6に同所性肺移植を行うことで、移植後21日目に約50%にOB(Obliterative Bronchiolitis)を発症する事を確認した。本研究ではこのモデルを用いて、肺及び縦隔リンパ節における遺伝子網羅的発現解析を行い、新規バイオマーカーの開発及びEBUS-TBNAによるリンパ節生検を用いたCLADの診断へとつなげるtranslational studyを計画した。上記モデルにて病理組織学的にOBを認めた群をOB群、BOを認めない非OB群、またコントロールをsham群とし、それらの肺、縦隔リンパ節検体に対するDNAマイクロアレイ、PCRを用いた網羅的遺伝子発現解析を行った。OB群の肺においては、自然免疫に加え、獲得免疫としてMHC class IIを介した抗原提示に関するプロセスの上昇を有位に認め、特定のケモカインやサイトカインを同定した。同様の解析をリンパ節検体において行うと、OB群ではmitotic nuclear division等の細胞分裂に関連する遺伝子群が多く抽出された。それに加え、移植肺と共通してAMR関連のサイトカインの高発現を認めた。さらに各群の肺、縦隔リンパ節検体、脾臓検体に対してreal-time PCR法による検証を行ったところ、拒絶肺と共通した特定の遺伝子の発現亢進を縦隔リンパ節内で認め、リンパ節生検におけるバイオマーカーになりうる事を確認した。本検討はEBUS-TBNAによるリンパ節生検を用いたCLADの早期診断法開発の足がかりになると考えられた。

Chronic lung dysfunction (CLAD) is a difficult and highly accurate method to diagnose in vivo lung transplantation. We confirmed that the C57BL/10 lung transplant was performed 21 days after transplantation and that 50% of the patients developed OB(Obliterative bronchitis). This study aims to analyze the occurrence of CLAD in the middle of the application, lung and tissue isolation, and to develop a new EBUS-TBNA application for the diagnosis of CLAD. The above is a summary of the analysis of gene expression in the OB group, BO group, non-OB group, CCT group, lung, tissue and tissue in pathology. The lung function of OB group, natural immunity, acquired immunity, MHC class II antigen prompt, related to the rise of body function, specific immunity, and body function are determined simultaneously. The analysis of the same sequence is based on the relationship between the mitotic nuclear division and the OB group. The high incidence of AMR related diseases was recognized in the study of lung transplantation. In addition, real-time PCR method was used to detect and reject the occurrence of specific genes in each group. This paper discusses the early diagnosis of EBUS-TBNA and its application.

项目成果

肺移植後慢性拒絶反応の病態解明：肺移植成績向上のための基礎的取り組み

阐明肺移植后慢性排斥反应的发病机制：改善肺移植结局的基础努力

• 发表时间: 2018
• 作者: 畑 敦;鈴木秀海;椎名裕樹;坂入祐一;田村 創;藤原大樹;和田啓伸;中島崇裕;千代雅子;吉野一郎
• 通讯作者: 吉野一郎

マウス肺移植後慢性拒絶モデルにおける縦隔リンパ節検体を用いた遺伝子網羅的発現解析

小鼠肺移植后慢性排斥模型纵隔淋巴结标本的综合基因表达分析

• 发表时间: 2018
• 作者: 畑 敦;藤原大樹;鈴木秀海;中島崇裕;椎名裕樹;太枝穂高;西井 開;海寶大輔;大橋康太; 佐田諭己;豊田行英;坂入祐一;田村 創;和田啓伸;山田義人;千代雅子;吉野一郎
• 通讯作者: 吉野一郎

肺移植成績向上のための研究基盤の確立に向けて ―マウスモデルによる肺移植後慢性拒絶の病態解明と克服―

建立改善肺移植结果的研究平台 - 利用小鼠模型阐明和克服肺移植后慢性排斥反应的发病机制 -

• 发表时间: 2018
• 作者: 畑 敦;鈴木秀海;椎名裕樹;坂入祐一;田村 創;藤原大樹;和田啓伸;中島崇裕;千代雅子;吉野一郎
• 通讯作者: 吉野一郎