パッチクランプ法を用いたGIRKチャネル作動薬の鎮痛作用の検討

膜片钳法检测GIRK通道激动剂的镇痛效果

• 批准号: 17K11110
• 负责人: 塩川 浩輝
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17K11110/
• 关键词: 選択的GIRKチャネル作動薬; GIRKチャネル; パッチクランプ法; 行動薬理学

今回の研究では行動薬理学的実験とパッチクランプ法を用いた電気生理学的実験とを同時並行で実施した。1.行動薬理学的実験 脊髄におけるML297の鎮痛効果を評価した。生体ラットの脊椎くも膜下腔にカテーテルを挿入し、数日後に経カテーテル的にML297を髄腔内投与することでML297がラットの侵害刺激に対する逃避行動にどのような影響を及ぼすかを検討した。機械的侵害刺激に対する逃避閾値を測定したところ、髄腔内投与されたML297は用量依存性に機械的侵害刺激に対する逃避閾値を増大させた。更に、さらにML297は逃避閾値を増大させるML２９７の用量を髄腔内投与しても運動機能に影響を与えないことを明らかにした。これらの結果から、ML297の髄腔投与は運動機能に影響を与えることなく、鎮痛作用をもたらすことが示唆された。2.電気生理学的実験 ML297が脊髄後角細胞を過分極させることを予備実験で見出しており、この現象がGIRKチャネルの活性化によるものなのか否かを検証した。脊髄スライス標本を用い、脊髄後角細胞からパッチクランプ記録を行った。電位固定法により、ML297により生じる外向き電流が用量依存性に増大することを明らかにした。またML297作動性の電流の電流-電圧関係を求めた結果、ML２９７作動性電流の平衡電位はカリウムチャネルと同等であることが明らかとなった。また、μオピオイド受容体拮抗薬のナロキソン存在下においても外向き電流を発生することが明らかになった。さらに、ML297は興奮性シナプス後電流の発生頻度を減弱させることも明らかとなった。以上の結果からML297はGIRKチャネルに作用して脊髄後角細胞を直接的に過分極させる作用とシナプス前性のGIRKチャネルに作用してグルタミン酸の放出を抑制する作用の２つのメカニズムにより鎮痛効果を発揮することが示唆された。

This time, we have studied the behavioral physiology of the human body, and we have used the laboratory of the physiology of the computer at the same time. 1. The practice of physiology causes severe ML297 pain and causes severe pain. After a few days, the ML297 was injected into the subdural space of the spinal cord, and the ML297 was injected into the lumen after a few days. The damage of the machine stimulates the detection of the device, the intracavitary injection and the dose dependence of the ML297 machine. Please do not use ML297 to avoid excessive consumption of ML297. Intra-cavity injection and mobile phone can have an impact on the performance of the machine. The results of the experiment, the ML297 voice message and the mobile phone can affect the performance of the computer and the computer, and the pain effect will indicate the instigation of the message. two。 The cell in the back of the ML297 spinal cord of computer physiology is very important to the equipment. It is the same as that of the GIRK physiology. The headers of the spine are used, and the cells in the back corner of the spine are recorded. The electric potential fixing method is very sensitive to the dependence of the amount of outward current on the production of ML297. Please check the results of ML297 Action current balance Voltage balance Test results and ML297 Action current balance balance Test results. The antagonistic effect of the capacitor on the export-oriented current in the presence of the capacitor is sensitive to the current situation. After the accident, the current generation rate is very low, and the current intensity is very low. The current is sensitive and sensitive after the accident. The above results show that the ML297