The role of Ac/N-end rule in the early development

点击翻译按钮获取中文摘要

マウスES細胞で発現している種々の未分化因子について、Ac/N-end ruleに適合するか否かによってタンパクの安定性が変化するかどうかを、Ac/N-end rule経路の主要アセチル化酵素であるNaa10をノックアウトしたマウスES細胞にてcycloheximide chaseによって検証した。残念ながら、明確に安定性が増すような因子を同定することはできなかった。一方で、Naa10を欠失させたマウスES細胞は、Naive状態からの分化モデルにおいて原始内胚葉への分化が亢進していることを見出した。よって、当初の仮説とは異なり、Naa10は未分化因子の安定性には関与していないが、何らかの他のメカニズムによってNaive状態からの分化に関与していることが示された。そこで、公開されているNaa10ノックアウトマウスES細胞のRNA sequencingデータを用いて、Pathway解析を行い、機能的に亢進している可能性のある経路を割り出したところ、Focal adhesion経路やMAPK経路などが抽出された。FGF4/MAPK経路は原始内胚葉分化に重要な役割を果たすことが明らかにされていることから、同経路の解析をNaa10ノックアウトマウスES細胞において行った。結果、Naa10ノックアウトマウスES細胞では、内在性MAPK経路が亢進しており、そのために原始内胚葉への分化偏向を生じていることが明らかとなった。よって、Naa10は当初の仮説のように未分化因子のバランスへの影響を介してではなく、何らかのメカニズムでFGF4/MAPK経路を修飾することでマウスES細胞の分化に関与することがわかった。