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生体細胞内の無染色分子イメージング技術の探索研究

活细胞无染料分子成像技术探索性研究

基本信息

批准号：
19656019
负责人：
井上康志
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

ポリクロメーターのスリットを利用した共焦点顕微光学系を構築し、エンドサイトーシスにより取り込まれた金ナノ粒子からのラマン散乱スペクトルを時系列に計測する分光システムの開発を行った。マクロファージ細胞が取り込んだ50nm径の金ナノ粒子からの表面増強ラマン散乱光は取り込み直後から観察され、原形質流動、タンパク質輸送などの細胞活性やブラウン運動に起因した金ナノ粒子のランダムな動きに合わせて、位置、時間に強く依存したスペクトルが計測された。それらスペクトルでは、チロシン、アラニン、フェニルアラニンなどのアミノ酸、グアニン、アデニンなどDNA塩基分子、リン脂質など数多くの生体分子由来のラマンバンドが観察された。さらに、ナノ粒子の動きをナノスケールで常時計測し、ナノ粒子からの散乱光を常に分光器内へと導く、フィードバック機構の装置化を行った。これにより、ナノ粒子を細胞内でトラッキングしながら、各位置でのスペクトルをリアルタイムで計測することを可能とし、細胞活性に関連する分子の動態をナノスケールの空間分解能で観察する技術を確立した。また、細胞深部での観察を容易にする銅ナノ粒子による長波長領域でのプラズモン共鳴についての検討を行った。まず、硝酸銅にアスコルビン酸、ポリビニルピロリドンを加えて銅イオンの還元を行い、銅ナノ粒子の合成を行った。動的光散乱法により8nm程度のナノ粒子が作製されていることを確認した。さらに、原子間力顕微鏡による観察でも同様のサイズのナノ構造体を観察した。しかしながら、570nmから600nmに見られるはずの銅ナノ粒子の吸収ピークは合成したナノ粒子の濃度が低いため観察されなかった。一方、150nmの比較的大きな銅ナノ粒子による吸収ピークが800nm近傍に観察された。今後は、合成法との最適化を行い収率を上げる必要があると考えている。

In this paper, we use the system of micro-optics in the system of confocal microoptics, the system of micro-optics, the system of micro-optics. This is due to the fact that there is a strong dependence on the surface of the 50nm and the scattered light on the surface to observe the temperature, the flow of the prototype, the transport of the cell activity, the cause of the accident, the location and the time dependence on the temperature, position and time. I don't know where the DNA is, the number of lipids is large, the origin of the biological molecules is different. The equipment is installed in the spectrometer of the scattered light spectrometer and the equipment of the equipment. The temperature in the cell, the cell, the temperature, the temperature In the deep part of the cell, it is easy to change the size of particles in the field of long wavelengths. In the presence of nitric acid and nitric acid, it is necessary to increase the concentration of trace elements, the synthesis of particles, and the synthesis of particles. The moving light scatter method is used to determine the 8nm level of the particles. The structure of the structure is the same as that of the atomic force. 570nm particles, 600nm particles, particles. On the one hand, 150nm compares the size of particles to the absorption of particles in the vicinity of 800nm. In the future, the synthesis method will improve the performance of the system.