权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

実質組織内の微量癌細胞の検出のための末梢血循環腫瘍細胞検出システムの応用

外周血循环肿瘤细胞检测系统在实质组织微量癌细胞检测中的应用

基本信息

批准号：
22659254
负责人：
野守裕明
金额：
$ 2.2万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010-04-01 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22659254/
关键词：
胸部外科学呼吸器外科呼吸器外科学

项目摘要

目的は末梢血液中循環癌細胞(CTC)を検出するために開発されたセルサーチシステムを用いて、生検組織やリンパ節などの実質組織内の微小癌細胞を検出する方法を確立することであり、今回は3年目の研究申請となる。同システムは本来CTCを検出するために開発され、7.5mLの血液(1×10^<5～7>Cells)中1個の癌細胞を検出できる。その方法を簡単に述べると、多くの血球成分から腫瘍細胞を分離するために、上皮細胞接着分子であるEpCAMに対する抗体を結合された磁性粒子(フェルロード)により血球成分から特異的に上皮細胞を分離・抽出し、さらに分離された上皮細胞に蛍光標識したサイトケラチン抗体をさせると共に、蛍光性のDNA染色物質DAPIで細胞核を染色する方法である。我々は実質組織内の微小癌細胞を検出するために、実質組織をsingle cell suspensionにして組織内の微量癌細胞を同システムにて検出することを研究の目的とした。その結果、脾細胞:腫瘍細胞の割合が1×10^9:1においても、脾細胞中の癌細胞の検出が可能であった。しかしその後肺を用いて判ってきたことであるが、癌細胞が無い正常肺にもEpCAMおよびサイトケラチンに反応する細胞、すなわち偽陽性があることが判った。そこで新たにCEAの抗体をシステムに加えて、正常肺組織中の癌細胞の検出を行った。その結果、CEAを加えると偽陽性が消失したため、CEAとサイトケラチンの組み合わせによる癌細胞検出は肺組織において有用であることが判った。今後、マウスの脾細胞と培養細胞株を脾細胞:癌細胞[1×10^9～1×105個:1]の割合で混在させ、各々の癌細胞混在率における感度と特異度を調べ、癌細胞の検出限界を明らかにする。その後、CEAおよびサイトケラチンと反応する培養細胞株を用いたマウスの肺転移実験モデルにおいて、肺組織内の微小癌細胞の検出を行う予定である。

Objective to determine the number of microcancer cells in peripheral blood (CTC). Objective to determine the number of microcancer cells in peripheral blood and to apply for this 3-year study. At the same time, one of the cancer cells in the blood (1 × 10 ^ & lt;5~7>Cells) of CTC was detected in the same way. The methods of isolation, isolation, identification, isolation, identification, identification and identification. DNA staining, DAPI staining, nuclei staining, nuclear staining, nuclear We investigate the expression of microcancer cells in the tissue and the microcancer cells in the single cell suspension tissue. The results showed that the splenic cells were cut at the ratio of 1 × 10 ^ 9: 1, and the cancer cells in the splenic cells were probably infected. After the treatment, the lung cancer cells were diagnosed as having no normal lung disease, and the cancer cells were not affected by the normal lung disease, the EpCAM cells, the cancer cells, the normal lungs, the normal lungs. New CEA antibodies were detected by Elisa, and cancer cells were detected in normal lung tissue. The results showed that CEA and CEA were useful in the diagnosis of lung cancer. In the future, the spleen cell culture cell line: the cancer cell [1 × 10 ^ 9 ~ 1 × 105: 1] was mixed in the cell, and the mixed rate of the cancer cell was significantly different from that of the cancer cell culture cell line. After treatment, CEA cells were incubated in vitro, and the cell lines were cultured in vitro. The lung tissue was transferred to the lung tissue and the microcarcinoma cells in the lung tissue were detected.