生物多様性を保つヒト唾液タンパク質由来能動・受動免疫型歯周病予防ワクチンの開発
开发基于主动/被动免疫的牙周病预防疫苗,该疫苗源自人类唾液蛋白,可保护生物多样性
基本信息
- 批准号:23390481
- 负责人:
- 金额:$ 7.57万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2011
- 资助国家:日本
- 起止时间:2011-04-01 至 2013-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度の当初の検討課題は、歯周病原菌と特異結合するヒト唾液タンパク質スタセリンおよびプロリンリッチプロテイン(PRP)上の最小結合部位アミノ酸配列を含むペプチドに対する、唾液IgA抗体による歯周病原菌の付着阻害効果をin vitroで検討することであった。1)まず、スタセリンおよびPRP上の最小結合部位アミノ酸配列を含むペプチド(Stat23およびPRP21)を作製・精製し、キャリアータンパク(KLH)に結合させ(多価)ペプチド複合体を作製すること。2)それらペプチド複合体を抗原とし、粘膜アジュバント(コレラトキシン(CT)、CpGオリゴDNA、Flt3L遺伝子配列をコードしたタンパク質発現DNAプラスミド)とともにマウスに経鼻投与し、唾液中に誘導される抗ペプチドIgA抗体を精製すること。3)その精製IgA抗体をインヒビターとして用い、それによる歯周病原菌の付着・定着阻害能を口腔内歯面モデルにて検討すること。であった。結果は、1)ペプチド合成をFmoc法により作製を試みたが、経済的、技術的な面で当初の作製予定量が確保できないと予想され、専門業者に外部注文した。2)2種の抗原および3種の粘膜アジュバントを組み合わせ、マウスに経鼻投与した。抗原特異的IgA応答を認めたものは、PRP21抗原のみであった。そのPRP21抗原に対する唾液IgA抗体の産生量について、最も効果の高い粘膜アジュバントは、CTであった。以後CTとPRP21を経鼻同時投与し、抗PRP21特異的唾液IgA抗体を精製し、約150匹のマウスから精製IgA抗体24.3mgが精製された。3)その精製IgA抗体溶液100μg/ml 100μLによるPRP被覆ハイドロキシアパタイトビーズへの歯周病原菌(P.gingivalis ATCC 33277)の付着阻害実験を行ったところ、最大97.7%の付着阻害が認められた。
This year の had の 検 は, 歯 weeks for subject specific pathogen と combining す る ヒ ト saliva タ ン パ ク qualitative ス タ セ リ ン お よ び プ ロ リ ン リ ッ チ プ ロ テ イ ン (PRP) on the minimum の combining site ア ミ ノ acid with column を containing む ペ プ チ ド に す seaborne る, saliva IgA antibodies に よ る 歯 weeks pathogen の pay the resistance against unseen fruit を in vitroで検 ask for する とであった とであった. 1) ま ず, ス タ セ リ ン お よ び PRP の minimum combining parts ア ミ ノ acid with column を containing む ペ プ チ ド (Stat23 お よ び PRP21) を cropping, refined し, キ ャ リ ア ー タ ン パ ク (KLH) に さ せ (価) ペ プ チ ド complex を cropping す る こ と. 2) そ れ ら ペ プ チ ド complex を antigen と し, mucous membrane ア ジ ュ バ ン ト (コ レ ラ ト キ シ ン (CT), CpG オ リ ゴ traces of DNA, Flt3L 伝 with sequence を コ ー ド し た タ ン パ ク qualitative 発 now DNA プ ラ ス ミ ド) と と も に マ ウ ス に 経 and し, saliva of nasal に induced さ れ る resistance ペ プ チ ド IgA antibodies を refined す る こ Youdaoplaceholder0. 3) そ の refined IgA antibodies を イ ン ヒ ビ タ ー と し て い, そ れ に よ る 歯 weeks pathogen の, pay a fixed on resistance to harm, can を 歯 in oral cavity surface モ デ ル に て beg す 検 る こ と. Youdaoplaceholder0. Results は, 1) ペ プ チ ド synthetic を Fmoc method に よ り cropping を try み た が, 経 な surface で 済, technology for the first quantitative が の as a system to ensure で き な い と to think さ れ qiqi tushuo, 専 door industry に external し た. 2) Two types of <s:1> antigens および and three types of <s:1> mucosa アジュバ トを トを groups み combined with わせ and ウスに ウスに were intranasally administered to the た. Antigen-specific IgA応 answer を recognize めた <s:1> <s:1> を, PRP21 antigen <e:1> みであった. そ の PRP21 antigen に す seaborne る saliva IgA antibodies discharge の に つ い て, most も unseen high の い mucosa ア ジ ュ バ ン ト は, CT で あ っ た. Subsequently, CTとPRP21を was administered intranasally simultaneously with <s:1>, anti-prp21-specific salival IgA antibody を refined <s:1>, approximately 150 pieces of <s:1> ウス ら ら refined IgA antibody 24.3mgが refined された. 3) そ の refined IgA antibodies solution 100 mu g/ml 100 mu L に よ る PRP coating ハ イ ド ロ キ シ ア パ タ イ ト ビ ー ズ へ の 歯 weeks pathogen (P.g ingivalis ATCC 33277) の pay the resistance against be 験 を line っ た と こ ろ, maximum 97.7% pay the resistance against が の recognize め ら れ た.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Novel vaccine development strategy for inducing mucosal immunity
诱导粘膜免疫的新型疫苗开发策略
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:6.2
- 作者:Fukuyama Y.;et al
- 通讯作者:et al
A Combination of Flt3 Ligand cDNA and CpG Oligodeoxynucleotide as Nasal Adjuvant Elicits Protective Secretory-IgA Immunity to Streptococcus pneumoniae in Aged Mice
- DOI:10.4049/jimmunol.1002837
- 发表时间:2011-02-15
- 期刊:
- 影响因子:4.4
- 作者:Fukuyama, Yoshiko;King, Janice D.;Fujihashi, Kohtaro
- 通讯作者:Fujihashi, Kohtaro
Nasal dendritic cell targeting Flt3 ligand as a safe adjuvant elicits effective protection against fatal pneumococcal pneumonia
鼻树突状细胞靶向 Flt3 配体作为安全佐剂可有效预防致命性肺炎球菌肺炎
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Kataoka K;et al;片岡宏介
- 通讯作者:片岡宏介
The Nasal Dendritic Cell-Targeting Flt3 Ligand as a Safe Adjuvant Elicits Effective Protection against Fatal Pneumococcal Pneumonia
- DOI:10.1128/iai.01360-10
- 发表时间:2011-07-01
- 期刊:
- 影响因子:3.1
- 作者:Kataoka, Kosuke;Fujihashi, Kohtaro;Oishi, Kazunori
- 通讯作者:Oishi, Kazunori
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- 影响因子:0
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井上 直敏
ダブルDNAアジュバント経鼻投与による若・老齢マウス唾液抗原特異的IgA抗体はPorphyromonas gingivalisの唾液タンパクへの結合を阻害する
鼻腔给予年轻和年老小鼠唾液抗原特异性 IgA 抗体双 DNA 佐剂可抑制牙龈卟啉单胞菌与唾液蛋白的结合
- DOI:
- 发表时间:
2019 - 期刊:
- 影响因子:0
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$ 7.57万 - 项目类别:
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- 资助金额:
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