胎児ＧＣ曝露に及ぼす環境化学物質の影響評価とヒト胎盤ＨＳＤ１１Ｂ２の関与

评估环境化学物质对胎儿GC暴露的影响以及人胎盘HSD11B2的参与

• 批准号: 23590154
• 负责人: 大野 修司
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hoshi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-04-28 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590154/
• 关键词: HSD11B2; HSD11B1L; コルチゾール代謝; SCDR10B

ヒト胎児への活性型GC (コルチゾール) 曝露に影響を及ぼす化学物質の評価系を構築するために、まずヒト胎盤に発現し、NAD(+)依存的にコルチゾールから不活性型GCであるコルチゾンへの代謝を触媒するヒトHSD11B2発現細胞株の作製を試みた。ヒトHSD11B2のmRNAコーディング配列は、極めてGCリッチであるため、発現細胞作製にあたり、コドンの最適化を行った上で発現ベクターを構築した。この発現ベクターをHEK293細胞中にトランスフェクションしたところ、コントロールと比較して一過性に発現させたHEK293細胞には高いHSD11B2活性が検出されたため、G418で発現細胞を選択し、当初目的としていた安定的にHSD11B2活性を持つ細胞株を得ることに成功した。また、このHSD11B2とは別に、NADP(+) 依存的にコルチゾールからコルチゾンへの代謝を触媒している可能性が推定され、かつ、ヒトではHSD11B2の発現が見られない脳内に高発現している HSD11B3 (HSD11B1L) についても、HSD11B2と対比させて化学物質の影響を検討する目的で、HSD11B2と同様に発現細胞株の作製を試みたが、現在のところまだ活性の検出には至っていない。しかしながら、HSD11B1Lについてはその配列情報を元に、Real-time PCR法による定量法の構築に成功し、その体内分布について検討を行ったところ、mRNAレベルでの発現量は、他の報告通り脳に多く発現していることが確認できたが、脳以外の組織でも胎盤や卵巣、精巣といったステロイド産生またはターゲット組織に発現しており、その発現量としてはHSD11B2よりむしろ多いことを明らかにした。

Youdaoplaceholder0 fetus 児へ <s:1> active GC (コ チゾ チゾ チゾ) Exposure に influence を and ぼ の review 価 す chemicals department を build す る た め に, ま ず ヒ ト placenta に 発 し, NAD (+) dependent に コ ル チ ゾ ー ル か ら type not active GC で あ る コ ル チ ゾ ン へ の metabolic を catalyst す る ヒ ト HSD11B2 発 now を try the cell lines の cropping み た. ヒ ト HSD11B2 の mRNA コ ー デ ィ ン グ match column は, extremely め て GC リ ッ チ で あ る た め, 発 now cells as に あ た り, コ ド ン の line optimization を っ た on で 発 now ベ ク タ ー を build し た. こ の 発 now ベ ク タ ー を HEK293 cells に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た と こ ろ, コ ン ト ロ ー ル と compare し て transient に 発 now さ せ た HEK293 cells に は high い HSD11B2 active が 検 out さ れ た た め, G418 で 発 now cells を sentaku し, original purpose と し て い た stable に HSD11B2 live The を holding of the を cell line を leads to the る とに とに success of <s:1> た. ま た, こ の HSD11B2 と は に, NADP (+) dependent に コ ル チ ゾ ー ル か ら コ ル チ ゾ ン へ の metabolic を catalyst し て い る possibility が presumption さ れ, か つ, ヒ ト で は HSD11B2 の 発 が now see ら れ な い 脳 に within high 発 now し て い る HSD11B3 (HSD11B1L) に つ い て も, HSD11B2 と than さ seaborne せ の て chemicals affect を beg す 検 る purpose で, HSD11B2 と with others に 発 now を try the cell lines の cropping み た が, now の と こ ろ ま だ active の 検 out に は to っ て い な い. <s:1> そ ながら, HSD11B1Lに に て て そ そ <s:1> allocation information を yuan に, Real-time Quantitative method of PCR method に よ る の constructing に し success, そ の distribution in vivo に つ い て 検 line for を っ た と こ ろ, mRNA レ ベ ル で の 発 now は, he reported の tong り 脳 に more く 発 now し て い る こ と が confirm で き た が, 脳 の organization で も placenta 巣 や eggs, pure 巣 と い っ た ス テ ロ イ ド produce ま た は タ ー ゲ ッ ト organization に 発 now し て お り, そ の 発 now quantity と し て は HSD11B2 よ り む し ろ more い こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

ヒト骨芽細胞由来細胞株とヒト卵巣顆粒膜細胞由来細胞株におけるアロマターゼ(CYP19)の発現に対するビスフェノールA (BPA)の影響

双酚A（BPA）对人成骨细胞源细胞系和人卵巢颗粒细胞源细胞系芳香化酶（CYP19）表达的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: 渡邉正忠;大野修司;中陳静男
• 通讯作者: 中陳静男

ブタ精巣におけるHSD11B1L (HSD11B3) 発現とGC不活性化への関与の可能性

HSD11B1L (HSD11B3) 在猪睾丸中的表达及其可能参与 GC 失活

• 作者: 大野修司;中川原慧美;本田容子;中陳静男
• 通讯作者: 中陳静男

Quantitative Analysis of UGT2B28 mRNA Expression by Real-Time RTPCR and Application to Human Tissue Distribution Study

实时 RTPCR 定量分析 UGT2B28 mRNA 表达及其在人体组织分布研究中的应用

• 发表时间: 2011
• 期刊: Drug Metabolism Letters
• 作者: Masatada Watanabe;Shuji Ohno and Shizuo Nakajin;Shuji Ohno and Shizuo Nakajin
• 通讯作者: Shuji Ohno and Shizuo Nakajin

Effect of &#61538;-agonist upon CYP19 expression in human monocyte-derived cell line

效果

• 作者: 渡邉正忠;大野修司;中陳静男
• 通讯作者: 中陳静男

ヒトhydroxysteroid 11beta-dehydrogenase 1-1ike protein (HSDHBIL) mRNA の生体内発現分布

人羟基类固醇11β-脱氢酶1-1样蛋白（HSDHBIL）mRNA的体内表达分布

• 作者: 中川原慧美; 大野修司;中陳静男
• 通讯作者: 中陳静男