权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

骨芽細胞を用いた小分子化合物スクリーニング法を基盤とした新規骨再生材料の開発

利用成骨细胞的小分子化合物筛选方法开发新型骨再生材料

基本信息

批准号：
23792216
负责人：
土居正典
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

歯の欠損後の顎骨は急速に吸収され、その後のインプラントや義歯補綴などの歯科治療を困難にする。強力な骨形成作用をもつ小分子化合物が開発できれば、既存の骨形成因子の課題の多くをより容易に解決できると期待される。申請者は、骨芽細胞が分化すると発光するように遺伝子操作することで、多種類の小分子化合物が含まれるライブラリーから骨芽細胞分化を促すものを系統的かつ迅速に抽出するシステムを作製することを着想した。本研究の目的は、骨芽細胞を用いた小分子化合物スクリーニングシステムを構築し,得られた化合物を利用して新規骨組織再生材料を開発することである。そのため、骨芽細胞分化の過程で高発現する因子であるI型コラーゲンのレポーター骨芽細胞を基盤としたスクリーニングシステムを構築し、新規の骨分化促進化合物を同定することを試みた。I型コラーゲン遺伝子の発現に伴いGFP蛍光を発現するように遺伝子操作した骨芽細胞を96 well培養プレートに播種し,既知の骨芽細胞分化促進因子であるBMP2成長因子あるいは小分子化合物(Phenamil, Resveratrol, Harmine)を添加した骨芽細胞分化誘導培地で培養した。培養7日後に蛍光マイクロプレートリーダーによりGFP蛍光量を測定し、これら骨芽細胞分化促進化合物の添加によってレポーター骨芽細胞におけるGFP蛍光発現が増強されることを確認した。今後、このシステムを用いて小分子化合物を含むライブラリーのスクリーニングを行う予定であったが、申請者の辞職に伴う科学研究費応募資格の喪失により実験を終了するに至った。

The jaw after dental defect is difficult to absorb and repair. The development of small molecule compounds with potent bone formation effects and the ease of solving existing problems of bone formation factors are expected. The applicant is interested in the rapid extraction of a variety of small molecule compounds that promote bone bud differentiation. The purpose of this study is to construct a new bone tissue regeneration system using small molecular compounds in bone bud cells, and to develop new bone tissue regeneration materials using these compounds. A new type of bone differentiation-promoting compound is proposed for the construction of a novel bone differentiation-promoting substrate for bone bud cells. The development of type I osteoblasts was accompanied by GFP fluorescence. The osteoblasts were cultured in 96-well culture and seeded. The osteoblasts differentiation was induced by the addition of small molecular compounds (Phenamil, Resveratrol, Harmine) known as BMP2 growth factors. After 7 days of culture, the amount of GFP light emitted by bone bud cells was determined and the amount of GFP light emitted by bone bud cells was confirmed. In the future, the use of small molecule compounds in the system will be determined, and the resignation of applicants will be accompanied by the loss of eligibility for scientific research.