生体イメージングによる大腸癌の転移と細胞周期の可視化

使用生物成像可视化结直肠癌转移和细胞周期

• 批准号: 24791418
• 负责人: 賀川 義規
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791418/
• 关键词: 細胞周期; 癌浸潤; 生体イメージング; Fucci

二光子顕微鏡を用いた生体イメージングは生体内において蛍光でラベルした細胞の動態を可視化する画期的な方法論である。この技術を利用し、がん組織で起こっている現象を時空間的にとらえ解析することが可能になった。これまで知られていなかったがん細胞の挙動を可視化し癌の動きと関連する浸潤・転移に関連する分子にせまる研究は新規治療の開発が期待されている。われわれは細胞周期を２色の蛍光プローブ（G1期-赤、S/G2/M期-緑）でリアルタイムに可視化するFucci(Fluorescent Ubiquitination-based Cell Cycle Indicator)をヒト大腸癌細胞株に遺伝子導入し安定細胞株を作成した。この細胞株をNOD/SCIDマウスの皮下に移植し4～5週間後に二光子顕微鏡を用いてがん細胞の挙動を時空間的に記録した。データは画像解析ソフトを用い赤と緑の細胞を追跡しそれぞれの平均速度を求めた。さらに赤と緑の細胞の相違をみるためにFucciの蛍光たんぱくをガイドとしたcDNA マイクロアレイ（Fucci guided microarray）を行い可動性に関連ある分子を探索した。その結果G1期-赤（n=310）とS/G2/M期−緑（n=450）の細胞の平均速度は、緑の細胞の方が速かった（p=0.033）。Fucci guided microarrayから緑の細胞（S/G２/M）で高発現する可動性に関連する分子（celmobilin; 仮称）を抽出した。生体イメージングは、生体内の「ダイナミクス」から、その「メカニズム」にせまる実験手法である。我々は生体内のがん細胞の動態をとらえその現象に関わる分子を抽出した。celmobilinの機能解析と臨床病理学的検討をおこないがん細胞の細胞可動性をターゲットとした次世代分子標的薬の開発・臨床応用へ発展できるものと考えている。

Two photon 顕 micromirror を with い た raw body イ メ ー ジ ン グ は born in vivo に お い て 蛍 light で ラ ベ ル し た cells の を dynamic visualization す る painting period な methodology で あ る. こ の technology using を し, が で ん tissue こ っ て い る phenomenon when を space に と ら え parsing す る こ と が may に な っ た. こ れ ま で know ら れ て い な か っ た が ん cells の 挙 を visualization し carcinoma の move き と masato even す る infiltrating planning moving に masato even す る molecular に せ ま る research は の open new rules treatment 発 が expect さ れ て い る. わ れ わ れ は Cell Cycle を 2 color の 蛍 light プ ロ ー ブ (G1 phase - red, S/G2 / M phase - green) で リ ア ル タ イ ム に visualization す る Fucci (Fluorescent Ubiquitination - -based Cell Cycle The 伝 remains of the をヒト colorectal cancer cell line were introduced into the <s:1> diazepam cell line を to produce <s:1> た. こ の cell lines を NOD/SCID マ ウ ス の subcutaneous し に transplantation between 4 ~ 5 weeks after に two photon 顕 micromirror を with い て が ん cells の 挙 dynamic spatial に record し を た. Youdaoplaceholder0 デ タ タ ソフトを image analysis ソフトを trace using を red と green <s:1> cells を それぞれ それぞれ <s:1> average speed を find めた. さ ら に と red and green の cells の conceives を み る た め に Fucci の 蛍 light た ん ぱ く を ガ イ ド と し た cDNA マ イ ク ロ ア レ イ (Fucci guided microarray) line を い mobility に masato even あ る molecular を explore し た. そ の results G1 phase - red (n = 310) と S/G2 / M phase - green (n = 450) の cells は の average speed, green の の party が speed か っ た (p = 0.033). Fucci guided microarray ら green <s:1> cells (S/G2/M) で high occurrence する mobility に related する molecules (celmobilin; 仮 scale) を extraction た. Born body イ メ ー ジ ン グ は, born in vivo の "ダ イ ナ ミ ク ス" か ら, そ の "メ カ ニ ズ ム" に せ ま る be 験 gimmick で あ る. In my 々 がん body, the dynamic of <s:1> がん cells <s:1> をとらえそ phenomena に are related to the を molecules を extraction of <s:1> た. Analytical と celmobilin の function of clinical pathology 検 を お こ な い が ん cells の mobility を タ ー ゲ ッ ト と し た nextgen molecular mark 薬 の open 発 · clinical 応 use へ 発 exhibition で き る も の と exam え て い る.