自然免疫反応増強のメカニズム解析と臨床応用

天然免疫应答增强机制分析及临床应用

• 批准号: 25461949
• 负责人: 徳本 憲昭
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25461949/
• 关键词: NK細胞; TRAIL; HSP70; 絶食刺激; exosome; 自然免疫能増強

NK細胞が免疫反応や抗腫瘍効果に重要な役割を果たしていることは周知の事実である。平成22年度科学研究費による研究において、絶食条件がNK細胞のフェノタイプ変化を引き起こし、TRAILを介した自然免疫能増強を引き起こす可能性をマウスの実験により示した。本研究は絶食によるNK細胞活性増強のメカニズムを解明し、その調節因子を明らかとすることによりNK細胞を中心とした自然免疫を制御し、周術期感染管理や腫瘍免疫に応用することが目的である。Heat Shock Protein (HSP) 70とNK細胞活性変化の検討B6マウスでは絶食により肝内リンパ球分画が変化し、NK細胞のTRAIL発現フェノタイプ変化が起こることを明らかとした。また肝組織から抽出した蛋白のWestern Blot解析からHSP70がNK細胞活性増強因子として作用している可能性が示唆された。i）細胞傷害性試験絶食マウス肝還流リンパ球を用いYAC-1、Hepa1-6をターゲットとした細胞傷害性試験を行い、絶食刺激がNK細胞のTRAILを介した細胞傷害性が亢進することを確認した。　　　ii）HSP70(rHSP70)が摂食マウス肝還流リンパ球に与える影響の確認　　　　　　　　　摂食マウス肝還流リンパ球をrHSP70添加下に培養し、フローサイトメトリー行いフェノタイプを確認した。rHSP70添加ではNK細胞のフェノタイプ変化は引き起こせなかった。可溶性HSP70はNK細胞に影響を与えることが出来ず、HSP70を含有するexosomeが関与する可能性が考えられた。今後、肝組織よりexosome抽出しHSP70が含まれていること、ならびに絶食刺激により増強することを示す予定である。また絶食刺激下の肝組織由来exosome（HSP70多い）とNK細胞を培養することにより、NK細胞のフェノタイプ変化、細胞傷害性を検討する予定である。

NK cells play an important role in immune response and anti-tumor effect. The scientific research fee for 2010 - 2011 indicates the possibility of natural immune enhancement induced by TRAIL and NK cell apoptosis induced by fasting conditions. The aim of this study is to investigate the role of NK cell activation in the regulation of immune response, infection management and tumor immune response. Heat Shock Protein (HSP) 70 and NK Cell Activity Activation and Detection of B6 and NK Cell TRAIL in Liver Western Blot analysis of protein extracted from liver tissue showed the possibility of HSP70 as an NK cell activity enhancing factor. i) Cell toxicity test: fasting for TRAIL in the liver. ii) HSP70 (rHSP70) "Food and beverage" is added to the culture medium. rHSP70 is added to NK cells. Soluble HSP70 has the potential to affect NK cells. HSP70 in liver tissue is expected to increase after fasting. Liver tissue derived from exosome (HSP70 +) under fasting stimulation, NK cell culture, NK cell transformation, and cell toxicity were determined.